一、秦皇岛地区十个鸡场鸡球虫种类的初步调查（论文文献综述）
王海霞[1]（2020）在《柔嫩艾美耳球虫盐霉素耐药株的诱导及耐药相关基因特性的初步分析》文中研究指明球虫病是世界上危害严重的寄生虫病之一,对养鸡业造成了巨大的经济损失。随着药物的广泛使用及不合理使用,耐药性成为无法避免的问题,但球虫耐药性形成的机制至今不清楚,也没有找到控制球虫产生耐药性的靶基因。本研究通过实验室诱导获得了柔嫩艾美耳球虫盐霉素耐药虫株,观察了盐霉素耐药株和敏感株子孢子和裂殖子的超微结构,分析了盐霉素耐药株和敏感株的差异表达基因,检测了3个鸡球虫田间分离株的耐药状况,利用单卵囊分离技术获得22个柔嫩艾美耳球虫盐霉素田间耐药株,对柠檬酸合酶（EtCS）、甲硫氨酸氨基肽酶（EtMetAP）、锚蛋白重复序列（EtANK）3个球虫耐药相关基因的特性进行了初步分析。1.柔嫩艾美耳球虫盐霉素耐药株的实验室诱导与电镜观察采用药物浓度递增法,以15 mg/kg（药物/饲料）为起始诱导浓度,经过24次传代,用鸡体药敏试验检测,获得对盐霉素60 mg/kg完全耐药的柔嫩艾美耳球虫耐药株。利用透射电镜观察了盐霉素耐药株子孢子和裂殖子的超微结构,发现耐药株虫体的形态变得不规则、细胞膜粗糙与肿胀、细胞核形状变得不规则甚至溶解、微线减少、支链淀粉增多等。2.柔嫩艾美耳球虫敏感株和耐药株的比较转录组学分析利用RNA-seq对柔嫩艾美耳球虫敏感株和盐霉素耐药株的子孢子和裂殖子进行转录组测序分析。结果显示,与敏感株相比,耐药株子孢子获得17个上调表达基因、13个下调表达基因;耐药株裂殖子获得606个上调表达基因、496个下调表达基因,子孢子和裂殖子共有差异表达基因18个。GO分析发现,耐药株子孢子的差异表达基因主要参与离子结合过程,耐药株裂殖子的差异表达基因主要参与细胞蛋白质代谢过程。用qPCR对差异表达基因进行了验证,结果与转录组测序结果基本一致。3.鸡球虫田间分离株的耐药程度检测与柔嫩艾美耳球虫盐霉素田间耐药株的分离从安徽不同养殖场收集样品,获得3个鸡球虫田间株（AH1、AH2、AH3）,通过鸡体药敏试验检测了田间株对5种抗球虫药物（地克珠利、盐霉素、癸氧喹酯、甲基盐霉素、氯苯胍）的耐药程度,除AH2对氯苯胍中度耐药外,所测虫株对其他药物完全耐药。用琼脂糖技术分离获得22个柔嫩艾美耳球虫单卵囊分离株,用qPCR分析了4个差异表达基因在2个单卵囊分离株及安徽1混合种的mRNA转录水平,与转录组测序结果一致。4.三个耐药相关基因特性的初步分析对3个球虫耐药相关基因（EtCS、EtMetAP、EtANK）进行克隆、表达与纯化,制备相应抗体,分析3个基因在柔嫩艾美耳球虫球虫未孢子化卵囊、孢子化卵囊、子孢子、裂殖子的转录水平和翻译水平,结果表明这三个基因在四个阶段的转录水平和翻译水平不一致,可能是翻译后修饰的结果。间接免疫荧光表明,EtCS、EtMetAP、EtANK分别定位于子孢子除折光体外的细胞质中、子孢子表面、子孢子的顶端、都定位于裂殖子的细胞膜和细胞质中。体外抑制实验表明,这3个蛋白都参与了子孢子入侵DF-1细胞的过程。用EtCS处理鸡巨噬细胞后发现,EtCS可与巨噬细胞结合,抑制巨噬细胞的增殖及NO的产生。对敏感株和不同耐药株进行转录水平分析,发现这3个基因在柔嫩艾美耳球虫地克珠利耐药株和马杜拉霉素耐药株中表达都显着上调,而在盐霉素耐药株中差异不显着,与转录组结果一致。但这3个基因在耐药株中的蛋白翻译水平与转录结果不一致。利用qPCR分析3个基因在单卵囊分离的盐霉素田间耐药株、安徽1混合种、单卵囊分离的地克珠利田间耐药株的mRNA转录水平,结果显示,与敏感株相比,3个基因在安徽1混合种的转录水平都很低;在3株地克珠利田间耐药株中,除EtCS在其中2株下调表达外,其余都上调表达;在3株盐霉素田间耐药株中,EtMetAP表达上调和EtCS表达下调,EtANK差异不明显;与盐霉素转录组结果不一致,可能是由于分离的田间耐药株存在多重耐药性。结论:本研究利用诱导获得的柔嫩艾美耳球虫盐霉素耐药株和敏感株进行比较转录组学分析获得差异表达基因,用田间分离的柔嫩艾美耳球虫盐霉素耐药株进行了验证,选取3个耐药相关基因进行初步分析,结果为进一步研究球虫耐药性产生的分子基础提供了基础。
李超,顾小龙,卢春霞,廖琴,刘贤勇,索勋[2]（2018）在《我国鸡球虫病流行病学研究进展》文中研究表明鸡球虫病在我国广泛流行,严重影响我国养鸡业健康发展。目前各地关于鸡球虫流行情况均有报道,但鲜见关于全国整体流行情况的报道分析。本文对建国后各地的调查报告进行了梳理,发现我国各地鸡群球虫感染率均在50%以上,常见的虫种有柔嫩、巨型、堆型、和缓和毒害艾美耳球虫等,影响我国鸡球虫病流行的因素有饲养管理方式、环境及气候、免疫抑制或其他疾病、鸡只日龄等。同时我们还发现文献中检测鸡球虫的手段还比较落后,仅采用镜检球虫卵囊的占60%以上,并且调查范围局限于一市的占80%以上。由此可见,我国鸡球虫病流行严重,影响因素较多,而且流行病学调查手段落后、范围小,我们应当采用综合防控措施,并提高检测手段,以期控制鸡球虫病流行,促进养鸡业健康发展。
黄兵,韩红玉,董辉,赵其平,朱顺海[3]（2018）在《畜禽球虫生物学与球虫病防治研究——记上海兽医研究所四十年研究回顾》文中研究表明为全面了解中国农业科学院上海兽医研究所（原中国农业科学院上海家畜寄生虫病研究所、中国农业科学院上海家畜血吸虫病研究所）在畜禽球虫生物学与球虫病防治研究方面取得的进展,本文从球虫的流行病学调查、虫种分离鉴定、诊断技术、药物防治、抗药性检测、免疫预防、体外培养、分子生物学等方面,介绍了上海兽医研究所近40年开展的主要工作和取得的研究结果,并提出了今后的重点研究方向。
黄月月[4]（2017）在《安徽部分地区鸡球虫种类鉴定及E.tenella的耐药性研究》文中指出由艾美耳属的多种球虫混合感染引起的鸡球虫病是养鸡业的主要疾病之一,危害甚大,给全世界的养禽业造成的经济损失非常严重。当前,对于鸡球虫病的预防和治疗仍然是依靠化学合成药物。但是,随着这些药物的普遍使用,球虫耐药性问题也越来越严重。本试验首先采集了安徽省肥西县、和县、全椒县、凤台县和舒城县五个地区共计147个养鸡场的粪样,通过形态学和分子生物学方法对这些地区的鸡球虫感染情况进行分析。确定了致病性较强的感染优势虫种是柔嫩艾美耳球虫（E.tenella）,选定五个地区常用的四种抗球虫药物作为检测药物,即磺胺氯吡嗪钠（Sulfachloropyrazine sodium）、地克珠利（Diclazuril）、癸氧喹酯（Decoquinate）和莫能菌素（Monensin）。分别采用最适抗球虫活性百分率（POAA）、相对盲肠卵囊产量（ROP）、抗球虫指数（ACI）和病变记分减少率（RLS）四项指标进行耐药性综合判定;结合随机扩增多态性DNA（RAPD）的方法进一步综合确定球虫的耐药性;同时结合PCR和RT-PCR法扩增各个球虫分离株三个可能与耐药相关的基因MIC-5、Cytb和ADF,测序分析不同虫株之间基因的序列差异;分析相关基因突变与耐药产生两者间的关系。结果表明:1、在调查的147个鸡场中有133个鸡场检测结果为阳性,安徽地区的总体感染率约为90.48%（133/147）。其中肥西县感染率高达93.55%。同时确定安徽地区鸡球虫感染的种类总共是6种,分别为毒害艾美耳球虫（E.necatrix）、柔嫩艾美耳球虫（E.tenella）、和缓艾美耳球虫（E.mitis）、巨型艾美耳球虫（E.maxima）、布氏艾美耳球虫（E.brunetti）及堆型艾美耳球虫（E.acervulina）,并且E.tenella的感染率最高,达84.21%;2、鸡体试验法检测可知和县株球虫对地克珠利轻度耐药,对癸氧喹酯中度耐药,对磺胺氯吡嗪钠和莫能菌素完全耐药;凤台株球虫对癸氧喹酯轻度耐药,对磺胺氯吡嗪钠、地克珠利和莫能菌素完全耐药;舒城株球虫对癸氧喹酯轻度耐药,对地克珠利、磺胺氯吡嗪钠和莫能菌素完全耐药;全椒株球虫对癸氧喹酯和地克珠利敏感,对莫能菌素轻度耐药,对磺胺氯吡嗪钠完全耐药;肥西株球虫对癸氧喹酯敏感,对地克珠利轻度耐药,对莫能菌素中度耐药,对磺胺氯吡嗪钠完全耐药;3、RAPD结果显示耐药程度不同的虫株之间的相似值（SI）也不一样,SI值最高为78.57%,存在两株敏感株之间,SI值最低的为40.00%,在和县耐药株与全椒耐药株之间。2个敏感株与5个分离株间的SI值也较低,表明耐药株的基因有较高的突变率;4、通过分析相关基因的突变与耐药性产生的关系,发现Cytb和ADF基因的序列与耐药性有关,但球虫对莫能菌素的耐药性与MIC-5基因的突变无关;球虫对地克珠利耐药性产生机制可能与ADF第520位碱基的突变有关;球虫对癸氧喹酯产生耐药性可能与Cytb第22位点发生的碱基突变有关;通过上述研究结果揭示了安徽省部分地区柔嫩艾美耳球虫对这些常用抗球虫药的耐药水平,并且分析和研究耐药性产生与哪些基因突变有关,为进一步探讨球虫的耐药机制提供理论依据,也为临床上快速检测球虫耐药性开辟新途径以及为解决球虫耐药性问题提供合适的手段与方法。
刘剑超[5]（2016）在《邵武市鸡球虫病流行病学调查》文中指出鸡球虫病危害重大,分布范围非常广泛,存在于大部分的养鸡场中,而且有很高的发病率,给养殖者带来巨大的经济损失。本研究通过对邵武市19家养鸡场进行了鸡球虫病的流行病学调查,包括鸡只品种、养殖方法、感染日龄等影响因素,旨在为邵武市养鸡业提供正确、合理的防治球虫病的依据。邵武市养鸡业主要集中在水北镇、和平镇、沿山镇、洪墩镇、肖家坊镇。通过对这5个乡镇的19家养鸡场进行调查发现,邵武市感染鸡球虫病的情况比较严重,每个鸡场均检测出球虫,鸡只的平均感染率达到了45.8%,其中水北镇的感染率为54.2%,和平镇的感染率为36.7%,沿山镇的感染率为46.7%,洪墩镇的感染率为46%,肖家坊镇的感染率为38.9%。经过数据统计,以31至60日龄的鸡感染率最高。鸡球虫的感染率还受到养殖方式和饲养管理水平的影响,笼养的感染率大大低于散养,良好的饲养管理水平也大大降低了鸡球虫的阳性率,即使鸡感染了球虫病,也不易暴发。通过对19个鸡场采集的鸡粪的显微镜观察,对鸡球虫卵囊的形态、大小、颜色等方面的辨别,邵武市的球虫种类有6种,分别是柔嫩艾美尔球虫,巨型艾美尔球虫,和缓艾美尔球虫,毒害艾美尔球虫,早熟艾美尔球虫和堆型艾美尔球虫,其中柔嫩艾美尔球虫的检出率最高,为77.2%。在显微镜（10×40）下观察统计球虫卵囊数量,结果显示邵武市球虫感染以轻度感染和中度感染为主,从日龄来看,以31至60日龄感染率最高,感染率为51.1%。通过对球虫进行耐药性试验,结果表明,邵武市的鸡球虫对莫能霉素、盐酸氨丙啉、妥曲珠利最为敏感,对地克珠利、盐霉素、磺胺喹恶啉、硝苯酰胺中度敏感,对马杜拉霉素完全不敏感。
郑艳琼[6]（2015）在《岳阳地区鸡球虫病感染情况调查及抗球虫药物防治试验》文中认为鸡球虫病使鸡的生产效率降低,对家禽业特别是规模化养禽业危害严重。鸡球虫卵囊的生长和繁殖需经过无性生殖和有性生殖两个阶段,鸡球虫病在我国普遍存在,并且给养鸡业带来较大的经济损失。有养鸡的地方都是鸡球虫病的流行区。岳阳地区白羽肉鸡和蛋鸡的养殖量逐年增加,鸡球虫病给白羽鸡的养殖造成了一定的损失,笔者在岳阳地区选择了岳阳县、岳阳楼区、泪罗市、平江县4个调查点,采用临床检查、病理解剖、粪便检查等方式调查岳阳地区白羽鸡球虫病的流行情况。结果显示：白羽肉鸡岳阳县、汨罗市、平江县三个调查点鸡球虫病的感染率为2.87%、2.88%、2.79%,蛋鸡岳阳楼区、泪罗市两个调查点鸡球虫病的感染率为12.0%、12.24%。白羽肉鸡15-42日龄、蛋鸡60-80日龄发病率较高,每年的第1季度和第4季度为本病的高发期。根据调查山字球虫粉、百球清、新球特、球新四种抗球虫药的治愈率分别为90%、90%、60%和60%,通过试验,经疫苗免疫后使用抗球虫药物治疗的治愈率为95%,未经疫苗免疫直接使用抗球虫药物治疗的治愈率为85%。笔者总结分析了,自2009年至今岳阳地区白羽鸡防控鸡球虫病的经历的无需防控、药物治疗和疫苗免疫结合药物治疗的三个阶段的防治效果,提出加强饲养管理、保证足够长的空栏期、加强季节性管理等综合防治鸡球虫病的基本思路。
刘富,徐前明,刘翠艳,李培英[7]（2014）在《安徽部分地区林地放养鸡感染球虫情况的调查》文中认为为了解安徽部分地区林地放养鸡球虫感染情况,采用群体采样法从安徽省舒城县、青阳县、霍山县和合肥市庐阳区等4个调查点,采集林地放养鸡群的新鲜粪样。用饱和盐水漂浮、离心沉淀和重铬酸钾培养等方法进行检查、分离和培养球虫卵囊。结果:林地放养鸡群鸡球虫总感染率为55.80%（77/138）;经形态学鉴定,所获球虫分别为柔嫩艾美耳球虫（Eimeria tenella）、和缓艾美耳球虫（E.mivati）、堆型艾美耳球虫（E.acervulina）、巨型艾美耳球虫（E.maxima）和毒害艾美耳球虫（E.necatrix）,其感染率分别为39.00%、14.00%、22.50%、12.00%和12.50%。这一结果为林地放养鸡群球虫病的防治提供了参考。
苏子超[8]（2012）在《临沂地区鸡球虫病流行病学调查及抗药性研究》文中认为鸡球虫病是一种由艾美耳属球虫引起的呈世界性分布的寄生虫病,给养鸡业造成巨大的经济损失。鸡球虫种类多,其中致病性最强的是柔嫩艾美耳球虫。目前防治鸡球虫病仍以使用抗球虫药为主,但药物在使用一段时间后,球虫都会对其产生耐药性,耐药性问题已成为药物防治鸡球虫病的主要障碍。目前,临沂地区鸡球虫病的流行情况尚未见报道,本文对临沂地区养殖场鸡球虫病的感染情况进行了调查,球虫总感染率为78%。分批次采取鸡粪便,采用饱和盐水漂浮法收集卵囊,制片镜检,观察卵囊和孢子化卵囊的形状、颜色、测量卵囊的大小,同时感染实验动物,记录寄生部位和病变情况,进行综合鉴定,鉴定出艾美尔属（Eimeria）球虫4种,即柔嫩艾美尔球虫（E. tenella）,堆型艾美尔球虫（E. acervulina）、巨型艾美尔球虫（E. maxima）口毒害艾美尔球虫（E. necatrix）,其中柔嫩艾美尔球虫（E. tenella）为本地鸡场球虫病病原的优势种,检出率52.31%,侵害鸡的盲肠,导致贫血、消瘦、甚至死亡。发病鸡以15-40日龄的雏鸡多。应用单卵囊分离技术成功分离出纯种球虫虫株,采用临沂地区常用的6种抗球虫药（癸氧喹酯、磺胺氯吡嗪钠、常山酮、地克珠利、氨丙林与妥曲珠利）对14日龄的雏鸡进行药物敏感实验,采用相对卵囊产量（ROP）.病变记分减少率（RLS）、最适抗球虫活性百分数（POAA）和抗球虫指数（ACI）等4项指标对抗药性的结果进行综合判定。4项指标均为阴性判为无抗药性（敏感）,有1项指标为阳性判为轻度抗药,有2项指标为阳性判为中度抗药,有3项及以上指标为阳性者则判为完全抗药。结果表明,磺胺氯吡嗪钠和地克珠利都具有完全抗药性,常山酮和癸氧喹酯中度耐药,故用这些药物防治此鸡场鸡艾美耳球虫病效果不佳；实验中球虫对氨丙林与妥曲珠利高度敏感,所以在此鸡场防治鸡艾美耳球虫病的临床应用中可推荐为首选药。
钱学智[9]（2011）在《海安县某规模鸡场球虫种类调查》文中认为江苏省海安县某大型肉鸡场多年来长期受到鸡球虫病的困扰,药物防治效果不理想,经济效益较差。本研究对该鸡场鸡球虫的种类进行了调查和初步鉴定,旨在为该鸡场球虫病的控制提供参考。从该鸡场采集3批（45日龄、50日龄和55日龄）鸡粪便,对其中球虫卵囊进行了分离、培养,根据孢子化卵囊的形态、颜色、大小、卵囊壁的厚度与光滑度、卵膜孔、极粒、内外残体的有无、孢子囊的形态结构、孢子囊和子孢子的大小以及出现时间对球虫种类进行了初步鉴定,随机观察100个孢子化卵囊,记录每种卵囊所占比例,并对柔嫩艾美耳球虫进行了初步分离和增殖。结果表明,该鸡场主要存在3种鸡球虫,3批日龄鸡基本一致,它们分别是柔嫩艾美耳球虫、巨型艾美耳球虫和堆形艾美耳球虫,其中柔嫩艾美耳球虫是优势虫种。
李佩国,李蕴玉,贾青辉,张艳英,张香斋,张文香[10]（2011）在《抗鸡球虫病药物及其耐药性现状》文中提出鸡球虫病是严重危害养禽业的重要寄生虫病之一,目前鸡球虫病的防治主要依靠抗球虫药。因抗球虫药的长期应用极易导致球虫耐药性,使药物的防治效果大大降低甚至失效。本研究对抗鸡球虫病药物的种类及耐药性现状进行了综述,并对球虫耐药性产生机理进行了探讨。
二、秦皇岛地区十个鸡场鸡球虫种类的初步调查（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、秦皇岛地区十个鸡场鸡球虫种类的初步调查（论文提纲范文）
（1）柔嫩艾美耳球虫盐霉素耐药株的诱导及耐药相关基因特性的初步分析（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 第一章 绪论 |
| 1.1 耐药性的定义 |
| 1.2 耐药性的类型 |
| 1.2.1 交叉耐药性 |
| 1.2.2 多重耐药性 |
| 1.3 实验室耐药虫株的诱导 |
| 1.4 耐药性检测的方法 |
| 1.4.1 鸡体检测法 |
| 1.4.2 同工酶分析法 |
| 1.4.3 超微结构的比较法 |
| 1.4.4 PCR技术测定法 |
| 1.5 抗球虫药物作用机理及其耐药性 |
| 1.5.1 离子载体类抗生素及其耐药机理 |
| 1.5.2 磺胺类抗球虫药物的耐药性 |
| 1.5.3 喹啉类抗球虫药物耐药性 |
| 1.5.4 抗硫胺素类抗球虫药物耐药性 |
| 1.5.5 吡啶类抗球虫药物的耐药性 |
| 1.5.6 三嗪类抗球虫药物及其耐药性 |
| 1.6 控制鸡球虫耐药性产生的策略 |
| 1.6.1 控制球虫的传播 |
| 1.6.2 合理的用药方案 |
| 1.6.3 综合治疗 |
| 1.6.4 定期检测耐药性 |
| 1.7 展望 |
| 第二章 柔嫩艾美耳球虫盐霉素耐药株的实验室诱导 |
| 2.1 引言 |
| 2.2 材料与方法 |
| 2.2.1 实验动物 |
| 2.2.2 试验虫株 |
| 2.2.3 实验试剂 |
| 2.2.4 实验仪器 |
| 2.2.5 试验药物 |
| 2.2.6 柔嫩艾美耳球虫盐霉素耐药株的实验室诱导 |
| 2.2.7 透射电子显微镜观察盐霉素耐药株与敏感株子孢子和第二代裂殖子的超微结构 |
| 2.3 结果 |
| 2.3.1 柔嫩艾美耳球虫盐霉素耐药株的诱导 |
| 2.3.2 诱导虫株的耐药性检测 |
| 2.3.3 透射电子显微镜观察敏感株与耐药株的超微结构 |
| 2.4 讨论 |
| 第三章 柔嫩艾美耳球虫敏感株与盐霉素耐药株差异基因的筛选与验证 |
| 3.1 引言 |
| 3.2 材料与方法 |
| 3.2.1 实验动物 |
| 3.2.2 实验虫株 |
| 3.2.3 实验药物 |
| 3.2.4 实验试剂 |
| 3.2.5 实验仪器 |
| 3.2.6 敏感株与盐霉素耐药株子孢子和第二代裂殖子的收集与纯化 |
| 3.2.7 敏感株和盐霉素耐药株子孢子和第二代裂殖子转录组测序 |
| 3.2.8 敏感株和盐霉素耐药株子孢子和第二代裂殖子差异表达基因的验证 |
| 3.3 结果 |
| 3.3.1 敏感株和盐霉素耐药株子孢子和第二代裂殖子总RNA的提取 |
| 3.3.2 敏感株和盐霉素耐药株子孢子和第二代裂殖子测序数据生物信息分析 |
| 3.3.3 敏感株和盐霉素耐药株子孢子和第二代裂殖子差异基因的筛选 |
| 3.3.4 敏感株和盐霉素耐药株子孢子和第二代裂殖子差异基因的验证 |
| 3.4 讨论 |
| 第四章 现场鸡球虫感染现状和耐药程度调查及盐霉素田间耐药株的分离 |
| 4.1 引言 |
| 4.2 材料与方法 |
| 4.2.1 实验动物 |
| 4.2.2 试验药物 |
| 4.2.3 实验试剂 |
| 4.2.4 实验仪器 |
| 4.2.5 田间株粪便样品的收集及繁殖 |
| 4.2.6 形态学鉴定田间株球虫种类 |
| 4.2.7 多重PCR鉴定球虫种类 |
| 4.2.8 药敏试验验证田间株耐药性 |
| 4.2.9 抗盐霉素田间株单卵囊的分离 |
| 4.2.10 qPCR分析差异表达基因在田间分离株的转录水平 |
| 4.3 结果 |
| 4.3.1 形态学鉴定田间株球虫种类 |
| 4.3.2 多重PCR鉴定球虫种类 |
| 4.3.3 药敏试验验证田间株耐药性 |
| 4.3.4 单卵囊分离田间盐霉素耐药株 |
| 4.3.5 差异表达基因在单卵囊分离株和田间混合种转录水平的分析 |
| 4.4 讨论 |
| 第五章 3个耐药相关基因功能特性初步研究 |
| 5.1 引言 |
| 5.2 材料与方法 |
| 5.2.1 实验动物 |
| 5.2.2 实验虫株、原核表达载体及细胞 |
| 5.2.3 实验试剂 |
| 5.2.4 实验仪器 |
| 5.2.5 敏感株孢子化卵囊的收集与纯化 |
| 5.2.6 敏感株孢子化卵囊总RNA的提取与c DNA的合成 |
| 5.2.7 耐药基因的扩增 |
| 5.2.8 基因的生物信息学分析 |
| 5.2.9 重组表达质粒的构建 |
| 5.2.10 重组蛋白的诱导表达与纯化 |
| 5.2.11 重组蛋白反应原性分析 |
| 5.2.12 抗重组蛋白多克隆抗体的制备 |
| 5.2.13 耐药基因在不同发育阶段和不同耐药株的转录水平分析 |
| 5.2.14 耐药基因在不同发育阶段和不同耐药株的翻译水平分析 |
| 5.2.15 耐药相关蛋白在子孢子入侵DF-1细胞后的定位 |
| 5.2.16 田间盐霉素耐药株和地克珠利耐药株对耐药基因进行验证 |
| 5.2.17 多克隆抗体对子孢子入侵DF-1细胞体外抑制实验 |
| 5.2.18 柠檬酸合酶对体外培养鸡巨噬细胞功能的影响 |
| 5.3 结果 |
| 5.3.1 敏感株孢子化卵囊的总RNA提取 |
| 5.3.2 耐药基因的克隆 |
| 5.3.3 基因的生物信息学分析 |
| 5.3.4 重组表达质粒的构建 |
| 5.3.5 重组蛋白的表达与纯化 |
| 5.3.6 重组蛋白的反应原性分析 |
| 5.3.7 三个基因在不同发育阶段的转录水平及翻译水平分析 |
| 5.3.8 三个基因在不同耐药株中的转录和翻译水平分析 |
| 5.3.9 三个基因在田间分离株的mRNA转录水平分析 |
| 5.3.10 三个蛋白在子孢子入侵DF-1细胞后的定位分析 |
| 5.3.11 多克隆抗体对子孢子入侵DF-1细胞体外抑制实验 |
| 5.3.12 柠檬酸合酶对体外培养鸡巨噬细胞功能的影响 |
| 5.3.13 r Et CS对一氧化氮(NO)生成量的测定 |
| 5.4 讨论 |
| 第六章 全文总结 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 作者简历 |
（2）我国鸡球虫病流行病学研究进展（论文提纲范文）
| 1 文献筛选 |
| 2 鸡球虫分类和学名汉语译名变化 |
| 3 检测方法 |
| 4 我国各地区鸡球虫病流行情况 |
| 5 影响鸡球虫病流行情况的因素 |
| 5.1 饲养管理 |
| 5.2 环境及气候 |
| 5.3 其他疾病 |
| 5.4 鸡只日龄 |
| 5.5 品种 |
| 6 结论与防治展望 |
（3）畜禽球虫生物学与球虫病防治研究——记上海兽医研究所四十年研究回顾（论文提纲范文）
| 0前言 |
| 1 流行病学 |
| 2 虫种分离 |
| 3 诊断技术 |
| 4 药物防治 |
| 5 抗药性检测 |
| 6 免疫预防 |
| 7 体外培养 |
| 8 分子生物学 |
| 1 0 展望 |
（4）安徽部分地区鸡球虫种类鉴定及E.tenella的耐药性研究（论文提纲范文）
| 致谢 |
| 摘要 |
| Abstract |
| 缩写和符号清单 |
| 文献综述 |
| 引言 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 试验材料 |
| 1.1.1 试验虫株 |
| 1.1.2 试验动物 |
| 1.1.3 菌株与载体 |
| 1.1.4 试验药物 |
| 1.1.5 主要试剂 |
| 1.1.6 主要仪器 |
| 1.1.7 所需溶液的配制 |
| 1.2 方法 |
| 1.2.1 安徽部分地区球虫种类鉴定 |
| 1.2.2 单卵囊分离 |
| 1.2.3 纯种卵囊的鉴定 |
| 1.2.4 耐药性检测-鸡体试验法 |
| 1.2.5 RAPD(随机扩增多态性DNA技术) |
| 1.2.6 柔嫩艾美耳球虫相关耐药基因的分析 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 调查安徽地区鸡球虫的种类 |
| 2.1.1 形态学的鉴定结果 |
| 2.1.2 分子生物学测定结果 |
| 2.2 单卵囊分离 |
| 2.3 纯种卵囊的增殖及鉴定 |
| 2.3.1 生物学鉴定 |
| 2.3.2 分子生物学鉴定 |
| 2.4 鸡体试验法检测耐药性 |
| 2.4.1 感染后试验组鸡的临床症状与剖检变化 |
| 2.4.2 和县株耐药性检测结果 |
| 2.4.3 凤台株耐药性检测结果 |
| 2.4.4 舒城株耐药性检测结果 |
| 2.4.5 全椒株耐药性检测结果 |
| 2.4.6 肥西株耐药性检测结果 |
| 2.5 RAPD的结果 |
| 2.5.1 筛选出的随机引物 |
| 2.5.2 E.tenella扩增的多态性分析 |
| 2.6 各个分离株相关耐药基因的测序与生物信息学分析 |
| 2.6.1 Cytb基因 |
| 2.6.2 MIC-5基因 |
| 2.6.3 ADF基因 |
| 3 讨论 |
| 3.1 关于安徽部分地区球虫种类调查 |
| 3.2 卵囊纯化技术 |
| 3.3 鸡球虫耐药性体内检测 |
| 3.4 RAPD法 |
| 3.5 耐药相关基因的分析 |
| 3.5.1 碱基突变与耐药性产生之间的关系 |
| 3.5.2 相关耐药基因的序列分析 |
| 4 结论 |
| 参考文献 |
| 作者简介 |
| 学术成果 |
（5）邵武市鸡球虫病流行病学调查（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 引言 |
| 第一章 综述 |
| 1.1 鸡球虫病的概况 |
| 1.1.1 鸡球虫病对养殖业的危害 |
| 1.1.2 鸡球虫病的病原 |
| 1.1.3 鸡球虫的生活史 |
| 1.1.4 鸡球虫病的致病性 |
| 1.1.5 鸡球虫病的临床症状 |
| 1.1.6 鸡球虫病的病理变化 |
| 1.1.7 鸡球虫病的诊断 |
| 1.1.8 影响鸡球虫病流行的因素 |
| 1.1.9 鸡球虫病的药物防治 |
| 1.1.10 鸡球虫的药物敏感性概况 |
| 1.1.11 综合防控措施 |
| 1.2 试验研究的目的和意义 |
| 第二章 邵武鸡球虫病的流行病学情况 |
| 2.1 材料和方法 |
| 2.1.1 调查地点选择 |
| 2.1.2 样品的收集 |
| 2.1.3 样品的处理 |
| 2.1.4 鸡球虫感染强度的判定 |
| 2.2 结果 |
| 2.2.1 各个调查地点及球虫的感染率 |
| 2.2.2 邵武市各个调查地点鸡球虫病的感染强度 |
| 2.2.3 各个日龄阶段鸡球虫感染情况 |
| 2.2.4 不同品种鸡的感染球虫状况 |
| 2.2.5 不同饲养管理水平对鸡感染球虫的影响 |
| 2.2.6 不同的养殖方式对鸡球虫感染率的影响 |
| 2.2.7 各个乡镇养鸡场不同艾美耳球虫的检出率 |
| 2.2.8 抗鸡球虫药物的选择 |
| 第三章 讨论 |
| 3.1 鸡球虫鉴别方法的讨论 |
| 3.2 邵武市鸡球虫病流行情况分析 |
| 3.3 邵武市鸡球虫的耐药性初步调查情况分析 |
| 3.4 鸡球虫病的综合性防治 |
| 第四章 结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
（6）岳阳地区鸡球虫病感染情况调查及抗球虫药物防治试验（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 第一章 文献综述 |
| 1.1 鸡球虫生活史 |
| 1.2 各种球虫造成的病变 |
| 1.3 鸡球虫病的诊断方法 |
| 1.4 影响鸡球虫感染的因素 |
| 1.5 世界及我国鸡球虫病流行现状 |
| 1.5.1 世界鸡球虫病流行现状 |
| 1.5.2 我国鸡球虫病流行现状 |
| 1.6 药物防治现状 |
| 1.6.1 常用的抗球虫药物 |
| 1.6.2 蒽环类抗生素 |
| 1.6.3 中药抗球虫药 |
| 1.6.4 岳阳地区常用的抗球虫药物 |
| 1.7 球虫疫苗研究现状 |
| 1.7.1 球虫疫苗研究进展 |
| 1.7.2 疫苗免疫存在的问题 |
| 1.8 研究的目的及意义 |
| 第二章 岳阳地区鸡球虫病感染情况调查 |
| 2.1 前言 |
| 2.2 试验材料 |
| 2.3 检测方法 |
| 2.4 实验结果 |
| 2.5 分析讨论 |
| 2.5.1 岳阳地区的气候利于球虫病流行 |
| 2.5.2 抓好饲养管理 |
| 2.5.3 保证足够长的空栏期 |
| 2.5.4 白羽肉鸡比蛋鸡感染率低 |
| 2.5.5 阳性率的季节性十分明显 |
| 第三章 抗球虫药对鸡球虫病治疗试验 |
| 3.1 前言 |
| 3.2 试验材料 |
| 3.2.1 试验动物 |
| 3.2.2 试验药物 |
| 3.3 试验方法 |
| 3.3.1 抗球虫药物的筛选 |
| 3.3.2 药物分组比较试验 |
| A. 试验方法 |
| B 试验效果的判定方法 |
| 3.4 试验结果 |
| 3.4.1 抗球虫药物的筛选结果 |
| 3.4.2 药物分组比较试验结果 |
| 3.5 分析讨论 |
| 3.5.1 抗球虫药物治疗效果明显 |
| 3.5.2 药物防治存在的主要问题是耐药虫株的产生 |
| 3.5.3 解决耐药性问题的办法 |
| 第四章 岳阳地区白羽肉鸡、蛋鸡鸡球虫防治现状及建议 |
| 4.1 前言 |
| 4.2 岳阳地区白羽肉鸡、蛋鸡球虫病防控现状调查 |
| 4.3 岳阳地区历年白羽肉鸡、蛋鸡球虫病防控措施分析 |
| 4.4 防控建议 |
| 4.4.1 抓好季节性防控 |
| 4.4.2 加强规模养殖场的饲养管理 |
| 4.4.3 使用疫苗免疫可有效降低球虫感染率 |
| 4.4.4 合理选择药物防控 |
| 4.4.5 提高鸡体的抗病能力 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 作者简介 |
（7）安徽部分地区林地放养鸡感染球虫情况的调查（论文提纲范文）
| 1材料与方法 |
| 1. 1粪样的采集 |
| 1. 2球虫卵囊检查 |
| 1. 3卵囊分离培养 |
| 1. 4感染强度的判定 |
| 1. 5虫种鉴定 |
| 2结果与分析 |
| 2. 1鸡球虫种类及感染情况 |
| 2. 2不同调查点鸡球虫的感染强度 |
| 2. 3各种球虫所占百分比 |
| 3讨论 |
（8）临沂地区鸡球虫病流行病学调查及抗药性研究（论文提纲范文）
| 中英文缩略表 |
| 目录 |
| 摘要 |
| Abstract |
| 引言 |
| 一、鸡球虫病原学研究进展 |
| 1.1 病原学 |
| 1.2 鸡球虫发育史 |
| 1.3 流行病学 |
| 1.3.1 宿主 |
| 1.3.2 传染源和传播媒介 |
| 1.3.3 传播媒介 |
| 1.3.4 流行特点 |
| 二、鸡球虫防治研究进展 |
| 2.1 加强饲养管理 |
| 2.2 免疫预防 |
| 2.3 药物预防与治疗 |
| 2.4 抗球虫药与球虫病疫苗的联合应用 |
| 2.5 鸡球虫病药物防治存在的问题 |
| 实验一 临沂市鸡球虫流行病学调查 |
| 1 实验材料 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 主要试剂 |
| 1.3 主要仪器 |
| 2 实验方法 |
| 2.1 粪样的采集 |
| 2.2 球虫卵囊的收集和观察 |
| 2.3 卵囊分离培养及鉴定 |
| 3 结果与分析 |
| 3.1 鸡球虫的感染情况 |
| 3.2 感染球虫的种类 |
| 4 讨论 |
| 实验二 鸡球虫的抗药性研究 |
| 1 实验材料 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 供试药物 |
| 2 实验方法 |
| 2.1 琼脂块的制作 |
| 2.2 卵囊液的稀释 |
| 2.3 单卵囊的分离 |
| 3 人工感染 |
| 4 球虫卵囊的增殖和纯化 |
| 5 抗药性实验 |
| 5.1 实验准备与分组 |
| 5.2 感染与给药 |
| 5.3 测定指标 |
| 6 结果与分析 |
| 6.1 单卵囊的鉴定 |
| 6.2 耐药性实验结果 |
| 7 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简介及硕士期间发表论文 |
| 攻读学位期间获得研究成果 |
（9）海安县某规模鸡场球虫种类调查（论文提纲范文）
| 1 材料与方法 |
| 1.1 样品采集 |
| 1.2 卵囊分离培养 |
| 1.3 球虫种类鉴定 |
| 1.4分离 |
| 1.4.1试验动物 |
| 1.4.2卵囊接种与柔嫩艾美尔球虫的初步分离 |
| 2 结果 |
| 2.1 球虫种类调查结果 |
| 2.1.1 柔嫩艾美耳球虫 |
| 2.1.2 巨型艾美耳球虫 |
| 2.1.3 堆形艾美耳球虫 |
| 2.2 3种球虫感染情况 |
| 2.3 柔嫩艾美尔球虫的初步分离结果 |
| 3 小结与讨论 |
（10）抗鸡球虫病药物及其耐药性现状（论文提纲范文）
| 1 抗鸡球虫病药物种类 |
| 1.1 聚醚离子载体类抗球虫药 |
| 1.1.1 莫能霉素 |
| 1.1.2 盐霉素 |
| 1.1.3 那拉霉素 |
| 1.1.4 马杜霉素 |
| 1.1.5 拉沙里霉素 |
| 1.1.6 海南霉素 |
| 1.2 化学合成类抗球虫药 |
| 1.2.1 磺胺类 |
| 1.2.2 酰胺类 |
| 1.2.3 吡啶类 |
| 1.2.4 胍类 |
| 1.2.5 喹啉类 |
| 1.2.6 抗硫胺素类 |
| 1.2.7 均苯脲类 |
| 1.2.8 植物碱类 |
| 1.2.9 三嗪类 |
| 2 抗球虫药耐药性现状分析 |
| 2.1 聚醚离子载体类抗球虫药的耐药性 |
| 2.2 化学合成类抗球虫药耐药性现状分析 |
| 3 球虫耐药机理探讨 |
| 4 结 论 |
四、秦皇岛地区十个鸡场鸡球虫种类的初步调查（论文参考文献）
- [1]柔嫩艾美耳球虫盐霉素耐药株的诱导及耐药相关基因特性的初步分析[D]. 王海霞. 中国农业科学院, 2020
- [2]我国鸡球虫病流行病学研究进展[J]. 李超,顾小龙,卢春霞,廖琴,刘贤勇,索勋. 寄生虫与医学昆虫学报, 2018(04)
- [3]畜禽球虫生物学与球虫病防治研究——记上海兽医研究所四十年研究回顾[J]. 黄兵,韩红玉,董辉,赵其平,朱顺海. 中国动物传染病学报, 2018(06)
- [4]安徽部分地区鸡球虫种类鉴定及E.tenella的耐药性研究[D]. 黄月月. 安徽农业大学, 2017(02)
- [5]邵武市鸡球虫病流行病学调查[D]. 刘剑超. 福建农林大学, 2016(05)
- [6]岳阳地区鸡球虫病感染情况调查及抗球虫药物防治试验[D]. 郑艳琼. 湖南农业大学, 2015(08)
- [7]安徽部分地区林地放养鸡感染球虫情况的调查[J]. 刘富,徐前明,刘翠艳,李培英. 畜牧与兽医, 2014(04)
- [8]临沂地区鸡球虫病流行病学调查及抗药性研究[D]. 苏子超. 山东农业大学, 2012(08)
- [9]海安县某规模鸡场球虫种类调查[J]. 钱学智. 中国畜牧兽医文摘, 2011(06)
- [10]抗鸡球虫病药物及其耐药性现状[J]. 李佩国,李蕴玉,贾青辉,张艳英,张香斋,张文香. 河北科技师范学院学报, 2011(04)