一、血红素氧化酶-1在脊髓缺血再灌注脊髓损伤后的表达（论文文献综述）
谭荣镑,魏波,李广盛[1]（2021）在《Nrf2-ARE调控神经-血管交互作用参与脊髓损伤后的神经修复》文中研究表明背景:神经血管损伤是脊髓损伤的主要病理生理特点。多年来广泛专注于神经或血管保护的单一治疗策略并未取得有效突破,而Nrf2因具有神经-血管的双重保护作用成为研究热点,但其介导神经-血管间的交互作用的机制还不明确。目的:对Nrf2-ARE调控神经-血管交互作用在脊髓损伤中的研究进展进行综述。方法:以"Nuclear Factor Erythroid 2-related Factor 2 （Nrf2）,neurovascularunit（NVU）,spinal cord injury（SCI）"为英文关键词,以"核因子E2相关因子2 （Nrf2）,神经血管单元,脊髓损伤"为中文关键词,检索2001至2020年期间收录在PubMed、Medline、中国知网、万方等数据库中的文献,筛选排除与研究目的无关与重复的文献,纳入符合标准的66篇文献进行综述。结果与结论:神经细胞与微血管内皮细胞的相互作用是维持脊髓正常神经功能的基础;Nrf2-ARE信号通路具有抗氧化应激损伤、抑制炎症损伤和抗凋亡的作用,它参与脊髓损伤神经修复的病理生理过程,并可能对神经细胞与血管内皮细胞有双重保护作用。对Nrf2神经血管保护机制的深入研究有助于探索脊髓损伤治疗新策略。
陈文凯[2]（2021）在《血红素加氧酶-1激活AMPK信号通路调节脊髓损伤后小胶质细胞介导的神经炎症》文中认为目的:1.观测和分析脊髓损伤（Spinal cord injury,SCI）后炎症细胞的变化动态;2.构建血红素加氧酶-1（Heme oxygenase-1,HO-1）过表达重组慢病毒（Lentivirus,LV）载体（LV-HO-1）,感染小胶质细胞;3.探讨HO-1过表达对SCI后小胶质细胞介导的神经炎症的作用;4.探讨HO-1过表达对SCI后小胶质细胞介导的抗神经炎症的分子机制。方法:1.通过重物压迫法构建SD大鼠SCI模型,应用单核细胞富集和流式细胞技术分析活体脊髓组织中小胶质细胞、巨噬细胞和淋巴细胞的数量占比,并检测这三种炎症细胞中HO-1 mRNA的表达水平;2.利用慢病毒构建HO-1过表达载体（LV-HO-1）,将其感染小胶质细胞诱导外源性HO-1过表达,结合应用实时荧光定量PCR（q-RT-PCR）和蛋白免疫印迹实验检测小胶质细胞中HO-1 mRNA和蛋白的表达水平;运用Annexin V–PI染色检测小胶质细胞的凋亡程度;应用实时荧光定量PCR方法检测IL-1β、IL-18、IL-10和TGF-βmRNA表达水平;3.将LV-HO-1感染后的小胶质细胞过继转移注射至损伤大鼠脊髓组织中,应用流式细胞分析和免疫荧光染色观察小胶质细胞的变化动态;应用q-RT-PCR方法检测HO-1 mRNA和多种促炎、抗炎因子mRNA的表达水平,并测定细胞中铁离子含量;应用流式细胞分析炎症细胞的数量变化;应用ELISA试剂盒检测脊髓组织中IL-1β、TNF-α和IL-6表达水平;应用HE染色和免疫荧光染色观察脊髓组织病理形态;应用TUNEL法标记凋亡细胞;应用BBB评分评估大鼠的运动功能变化情况;4.将LV-HO-1感染后的小胶质细胞过继转移注射至脊髓中,应用流式细胞筛选出过继转移的小胶质细胞;通过q-RT-PCR方法筛查小胶质细胞激活相关的转录因子（IRF5、IRF1、SP1、STAT2、IRF4、STAT6、PPARγ、STAT1、SP3、KLF4）mRNA;在体外条件下使用脂多糖构建炎症模型,加入AMPK信号通路的抑制剂以进行反向验证。结果:1.SCI后第1、3、7、14 d,小胶质细胞中HO-1 mRNA的表达水平先上升后降低,而小胶质细胞数量占比先下降后上升;2.成功构建LV-HO-1,并高效感染小胶质细胞;3.LV-HO-1感染的小胶质细胞过继转移后在脊髓组织中依旧维持HO-1高表达,并且能够抑制多种促炎因子的分泌,抑制炎症在SCI部位的浸润,减轻脊髓组织的病理损伤、抑制细胞凋亡和促进大鼠运动功能恢复。4.HO-1过表达上调小胶质细胞中AMPK信号通路,抑制脂多糖诱发的小胶质细胞促炎因子IL-1β、TNF-α和IL-6的分泌。结论:1.SCI后,小胶质细胞中HO-1的表达水平与小胶质细胞数量占比密切相关;2.LV-HO-1在体外可高效感染小胶质细胞;3.LV-HO-1感染的小胶质细胞过继转移,可抑制促炎因子分泌、减少炎症细胞浸润、减轻脊髓组织的病理损伤和促进大鼠运动功能恢复。4.HO-1过表达通过上调小胶质细胞AMPK信号通路调节脊髓神经炎症。
程杰[3]（2021）在《鼠尾草酸抑制铁死亡减轻脊髓损伤的实验研究》文中认为目的:脊髓损伤（spinal cord injury,SCI）后损伤部位出现各种病理级联反应,导致一系列细胞死亡的发生。反之,死亡的细胞释放众多危险信号,进而加重继发性损伤,形成一种恶行循环。铁死亡是一种新明确的细胞死亡形式,广泛参与中枢神经系统相关疾病的发生发展。鼠尾草酸（carnosic acid,CA）是一种双萜类小分子化合物,具有抗氧化、神经保护等作用,但目前尚缺乏鼠尾草酸对脊髓损伤保护性效应的研究。故本研究的主要目的是:1)制备大鼠脊髓损伤模型,探究铁死亡在脊髓损伤后的表现及其时间进程;2)借用PC12细胞拟神经元细胞构建铁死亡模型,在体外环境中探究鼠尾草酸能否抑制铁死亡;3)探索鼠尾草酸抑制铁死亡的作用机制;4)体内实验探究鼠尾草酸能否促进SCI大鼠神经功能恢复,及其具体机制。方法:1)将SD大鼠随机分为6个组:假手术组、SCI-6h组、SCI-1d组、SCI-3d组、SCI-7d组和SCI-14d组。利用改良的Allen’s重物坠落法制备大鼠脊髓损伤模型。利用生物信息学对脊髓损伤和铁死亡共同靶点进行分析,借用RT-q PCR技术对铁死亡特异性基因PTGS2、RPL8F、HMGB1、ATP5G3、IREB2和CS进行定量分析,免疫印迹（western blot,WB）检测各组中ACSL4、FPN、FTH1、GPX4和x CT的蛋白质表达水平,利用普鲁士蓝染色和铁离子试剂盒测量各组脊髓组织中铁离子水平,试剂盒检测各组GPX4酶活性水平,借用FJB染色分析变性神经元细胞情况;2)细胞增殖活性检测试剂盒（CCK-8）检测不同浓度的鼠尾草酸和erastin对PC12细胞活性的影响,确定后续实验所需药物浓度。实验分为6个组:对照组、模型组、阳性对照组（Fer-1组）、低、中、高剂量鼠尾草酸组。试剂盒检测各组中丙二醛（malonaldehyde,MDA）、谷胱甘肽（glutathione,GSH）、二价铁离子(Fe2+)和谷胱甘肽过氧化物酶4（glutathione peroxidase 4,GPX4）活性的水平。利用流式细胞技术检测鼠尾草酸对细胞内ROS水平的影响。利用Mito-Tracker Red染色及醋酸双氧铀和枸橼酸铅双染色观察鼠尾草酸对线粒体膜电位和形态的影响;3)实验分为九个组:对照组、模型组、低剂量CA干预组、中剂量CA干预组、高剂量CA干预组和Nrf2抑制剂组。采用WB和免疫荧光（immunofluorescence,IF）技术检测鼠尾草酸对Nrf2表达水平和分布的影响,利用RT-q PCR和WB分别检测鼠尾草酸对Nrf2、x CT、GCLM、GCLC、GSS、GPX4、FTH1和FPN的m RNA和蛋白质表达的影响。试剂盒检测鼠尾草酸对MDA、GSH、Fe2+和GPX4酶活性的影响;4)将SD大鼠随机分为4个组:假手术组、模型组、鼠尾草酸低剂量组、鼠尾草酸高剂量组。借用BBB评分和斜板实验评估大鼠的运动功能,采用HE染色观察脊髓形态的变化,利用FJB染色和尼氏染色观察鼠尾草酸对脊髓损伤后神经元细胞状态的影响,利用试剂盒检测鼠尾草酸对脊髓损伤后MDA、GSH、Fe2+和GPX4酶活性的影响,借用RT-q PCR和WB技术分别检测鼠尾草酸对脊髓损伤后铁死亡相关靶点的m RNA水平和蛋白质水平的影响。结果:1)RT-q PCR结果显示,脊髓损伤后PTGS2、RPL8F和HMGB1的m RNA水平高于假手术组（P<0.01）,其中PTGS2在脊髓损伤后6小时表达最高,RPL8F和HMGB1约在第三天达到峰值。WB结果显示,术后第3天ACSL4的表达水平较假手术组显着升高（P<0.01）;脊髓损伤后FPN的表达水平显着降低（P<0.01）,术后第3天表达最低,而FTH1在术后第3天表达水平显着升高（P<0.01）;脊髓损伤后第1天,GPX4和x CT的表达较假手术组显着降低（P<0.01）。脊髓组织铁离子检测结果显示,脊髓损伤后6小时,铁离子水平显着增加（P<0.01）,第3天达到最高峰。术后第1天,GPX4酶活性较假手术组显着降低（P<0.01）,第3天达到最低值。FJB染色结果显示术后6h,变性的神经元数量即显着增加（P<0.01）,术后第3天达到峰值;2)CCK-8结果显示,鼠尾草酸浓度≤20μM对PC12细胞无明显毒性作用（P>0.5）,选择浓度为1、5和10μM的鼠尾草酸用于后续实验。结果显示,鼠尾草酸能够恢复erastin诱导的PC12细胞活力下降。Erastin刺激诱导PC12细胞,能够明显地降低细胞内GSH水平和GPX4酶活力（P<0.01）,同时增加细胞内MDA的含量（P<0.01）,而鼠尾草酸能够逆转erastin所产生的效应。流式结果显示erastin能够增加PC12细胞内ROS水平（P<0.01）,而鼠尾草酸能够降低ROS的含量（P<0.01）。线粒体形态观察结果显示,erastin能够降低线粒体膜电位,导致线粒体皱缩、线粒体嵴减少或消失,而鼠尾草酸能够明显地改善线粒体膜电位和形态的变化;3)RT-q PCR结果显示,鼠尾草酸对PC12细胞内Nrf2的m RNA水平无明显作用,但WB和IF结果显示,与模型组相比,鼠尾草酸显着增加了细胞内Nrf2蛋白质水平,同时促进了其向细胞核内聚积。RT-q PCR和WB的结果显示,鼠尾草酸能够显着地上调PC12细胞内x CT、GCLM、GCLC、GSS、GPX4、FTH1和FPN的m RNA及蛋白质表达水平,而Nrf2特异性抑制剂ML385能够削弱鼠尾草酸的上调效应;4)BBB运动学评分结果显示,术后第7天,SCI+H-CA组的BBB评分优于SCI组（P<0.05）,从术后第14天开始,SCI+L-CA组和SCI+H-CA组的BBB评分高于SCI组。斜板实验结果显示,术后第3天,SCI+H-CA组的斜坡角度大于SCI组（P<0.05）,从术后第7天开始,SCI+L-CA组和SCI+H-CA组的斜坡角度明显优于SCI组（P<0.01）。与SCI组相比,鼠尾草酸能够减轻脊髓组织形态病理学改变,减少变性神经元数量（P<0.01）,增加存活的神经元数目（P<0.01）。鼠尾草酸能够逆转脊髓损伤后高水平的PTGS2的m RNA含量、ACSL4的蛋白质含量、MDA含量和铁离子含量,以及低表达的GSH含量和GPX4酶活性水平。RT-q PCR和WB实验结果显示,与SCI组相比,鼠尾草酸能够上调Nrf2、x CT、GCLC、GCLM、GSS、GPX4、FPN和FTH1的m RNA表达水平及蛋白质表达量。结论:1)铁死亡参与脊髓继发性损伤过程,并且在损伤早期（6 h）即可出现铁死亡现象,于术后第3天最显着;2)鼠尾草酸能够抑制erastin诱导的PC12细胞铁死亡的发生;3)鼠尾草酸能够通过激活Nrf2通路,上调GSH-GPX4轴,同时增加FTH1和FPN的表达水平,提高细胞内源性抗氧化能力,进而抑制铁死亡的发生;4)鼠尾草酸能够通过激活Nrf2通路,抑制铁死亡的发生,增加存活的神经元细胞,减轻脊髓损伤,促进神经功能的恢复。
林小龙[4]（2020）在《2-（2-苯并呋喃基）-2-咪唑啉在急性脊髓损伤大鼠模型中的神经保护作用及其机制研究》文中研究说明第一部分2-（2-苯并呋喃基）-2-咪唑啉在脊髓损伤大鼠模型中的作用目的:既往研究表明2-（2-苯并呋喃基）-2-咪唑啉（2-（-2-benzofuranyl）-2-imidazoline,2-BFI）在多种病理生理过程中参与抗氧化、抗炎症、抗凋亡。但是2-BFI在脊髓损伤模型中的作用尚不清楚。因此本实验采用钳夹法建立脊髓损伤（spinalcord injury,SCI）大鼠模型并利用该模型探讨2-BFI在脊髓损伤大鼠模型中潜在作用。方法:实验用成年雄性SD大鼠随机分为3组:（1）假手术组（Sham组）;（2）对照组（SCI+vehicle组）;（3）实验组（SCI+2-BFI组）。参照既往文献,建立了脊髓损伤大鼠实验模型。将大鼠麻醉后俯卧位固定置于专用手术台上。取后正中切口,从T10椎板到T12椎板行椎板切除术,充分暴露脊髓。假手术组仅仅行T10-T12椎板切除术,暴露脊髓而不引起脊髓损伤为标准。对照组及实验组大鼠利用70g闭合力Yasargil动脉瘤夹钳夹脊髓60秒,损伤成功的指标包括局部脊髓出现红肿、压迫后双后肢立即抽动、大鼠清醒时双侧后肢麻痹。药物注射（2-BFI腹腔注射3 mg/kg或0.9%生理盐水,每日2次,共3日）由一名对实验分组不熟悉的研究人员进行。所有大鼠在造模后第1、2、3、7、14、21天进行神经功能评估。神经功能评估采用BBB（Basso、Beattie and Bresnahan）神经功能评分量表,评分范围从0分到21分。结果:SCI大鼠运动神经功能采用BBB运动能力评定量表进行评定。假手术组术后即刻、术后1-3天、7天、14天、21天得分均为21分。在SCI发生后第1天,对照组和实验组的BBB运动能力评分均迅速下降,分别为0.17±0.41及0.17±0.41,相对于假手术组,两组的BBB评分呈显着性下降（p<0.05）,但两组之间并无统计学差异（P>0.05）。虽然在SCI发生后第3天,实验组的BBB评分高于对照组,分别为2.00±1.09及1.33±0.82,但两组之间仍无统计学差异（P>0.05）。但在SCI发生后第7天,实验组的BBB评分则高于对照组,且两者差异存在统计学意义（分别为4.33±0.52及3.33±0.52,p<0.05）。同样的结果也出现在SCI发生后第14天,实验组的BBB评分明显高于对照组（6.17±0.98及4.67±0.822,p<0.05）。将观察期延迟到SCI发生后的第21天,实验组的BBB评分明显大于对照组,且两组之间的差距更加明显（8.00±1.10及 6.17±0.98,p<0.01）。结论:通过2-BFI处理后SCI大鼠的BBB评分明显高于对照组,说明腹腔注射2-BFI（3mg/kg）后可显着改善SCI后BBB神经功能评分,在脊髓损伤大鼠模型中具有神经保护作用。第二部分 2-（2-苯并呋喃基）-2-咪唑啉在脊髓损伤大鼠模型中的神经保护作用机制目的:本部分实验采用钳夹法建立脊髓损伤（spinal cord injury,SCI）大鼠模型并利用该模型证实 2-（2-苯并呋喃基）-2-咪唑啉（2-（-2-benzofuranyl）-2-imidazoline,2-BFI）对脊髓损伤大鼠的神经保护作用,并探讨2-BFI神经保护作用机制。方法:根据第一部分实验结论的进一步延续,采用动脉瘤夹钳夹脊髓的方法造模。实验用成年雄性SD大鼠随机分为3组:（1）假手术组（Sham组）;（2）对照组（SCI+vehicle组）;（3）实验组（SCI+2-BFI组）。SCI+vehicle组大鼠腹腔注射0.9%生理盐水,每日2次,共3日;SCI+2-BFI组大鼠腹腔注射2-BFI溶液,剂量为3 mg/kg,每日2次,共3日。药物注射由一名对实验分组不熟悉的研究人员进行。假手术组仅仅行T10-T12椎板切除术,暴露脊髓而不引起脊髓损伤为标准。在脊髓损伤后第3天,所有大鼠均行腹腔注射戊巴比妥钠（100mg/kg）深度麻醉并处死。损伤部位周围脊髓组织立即取出并置于冰面上用200m14℃0.9%生理盐水灌洗。Western blot检测Bcl-2、Bax和caspase-3蛋白。使用ELISA试剂盒,对脊髓组织样本中超氧化物歧化酶（SOD）和谷胱甘肽过氧化物酶（GPx）活性进行检测。FJB染色和TUNEL染色检测损伤部位周围脊髓组织的细胞坏死和凋亡。结果:与假手术组相比,对照组SOD和GPx活性均明显降低（P<0.01）。同时,SOD和GPx活性在使用2-BFI后明显升高（P<0.05）。脊髓损伤大鼠脊髓组织中Bax蛋白及cleaved caspase-3蛋白水平（p 19和p 17）明显升高,Bcl-2蛋白水平明显降低（P<0.01和P<0.05）。而2-BFI的应用显着提高了 SCI后Bcl-2蛋白水平（P<0.01）,Bax蛋白和cleaved caspase-3蛋白水平（p19和p17）都被下调。与此同时,对照组与假手术组相比,Bcl-2/Bax比值在SCI后明显降低,而在使用2-BFI后,实验组较对照组Bcl-2/Bax比值明显升高（P<0.01）。假手术组脊髓切片未见FJB阳性或TUNEL阳性细胞,然而在对照组中可见大量FJB阳性细胞和TUNEL阳性细胞,使用2-BFI治疗后FJB阳性细胞和TUNEL 阳性细胞数量显着降低（P<0.05和P<0.01）。结论:2-BFI的应用上调SOD和GPx的活性,上调Bcl-2蛋白的表达,下调Bax蛋白和cleaved caspase3（p17和p19）蛋白的表达,进一步证实其神经保护作用。此外,FJB染色和TUNEL染色显示细胞坏死和凋亡水平降低也佐证了 2-BFI的神经保护作用。综上所述,这些结果提示2-BFI可能通过抑制氧化应激反应和细胞凋亡坏死来减轻脊髓损伤,从而提高脊髓损伤后的功能恢复。第三部分 2-（2-苯并呋喃基）-2-咪唑啉在脊髓损伤大鼠模型中神经保护作用的调节机制目的:本部分实验采用钳夹法建立脊髓损伤（spinal cord injury,SCI）大鼠模型并利用该模型证实 2-（2-苯并呋喃基）-2-咪唑啉（2-（-2-benzofuranyl）-2-imidazoline,2-BFI）是否通过激活核转录因子-E2相关因子/血红素加氧酶（Nrf2/HO-1）信号通路,引起下游抗氧化、抗凋亡相应蛋白变化从而保护神经细胞。方法:根据第二部分实验结果的进一步延续,采用动脉瘤夹钳夹脊髓的方法造模。实验用成年雄性SD大鼠随机分为3组:（1）假手术组（Sham组）;（2）对照组（SCI+vehicle组）;（3）实验组（SCI+2-BFI组）。对照组大鼠腹腔注射0.9%生理盐水,每日2次,共3日;实验组大鼠腹腔注射2-BFI溶液,剂量为3mg/kg,每日2次,共3日。药物注射由一名对实验分组不熟悉的研究人员进行。假手术组仅仅行T10-T12椎板切除术,暴露脊髓而不引起脊髓损伤为标准。在脊髓损伤后第3天,所有大鼠均行腹腔注射戊巴比妥钠（100mg/kg）深度麻醉并处死。损伤部位周围脊髓组织立即取出并置于冰面上用200ml4℃0.9%生理盐水灌洗。Westernblot检测Nrf2、HO-1和NQO1蛋白。利用免疫荧光染色技术定位Nrf2蛋白,观察损伤部位周围脊髓组织神经元细胞和星形胶质细胞中的Nrf2表达量变化。结果:与假手术组相比,对照组和实验组脊髓组织中无论Nrf2蛋白还是HO-1蛋白都有明显升高（P<0.01）,而与假手术组相比,对照组NQO1蛋白表达降低（P<0.01）。此外,与对照组相比,实验组Nrf2和HO-1进一步显着升高（P<0.01）。但对照组与实验组NQO1表达差异无统计学意义（P>0.05）。免疫荧光染色显示,Nrf2蛋白无论在神经元细胞还是星形胶质细胞中的表达,对照组及实验组均显着高于假手术组（P<0.01）。此外,实验组神经元细胞内、星形胶质细胞内Nrf2水平明显高于对照组（P<0.01）。结论:脊髓损伤后2-BFI处理增加了 Nrf2蛋白和HO-1蛋白的表达,表明2-BFI可激活Nrf2/HO-1信号保护脊髓损伤后的神经细胞。总之,这些结果为2-BFI通过激活Nrf2/HO-1信号通路减轻脊髓损伤,提高脊髓损伤后的功能恢复提供了有力证据。
张睿[5]（2020）在《缺血后适应干预大鼠脊髓再灌注损伤时对CaSR和Caspase-12的影响》文中研究指明目的:验证缺血后适应（Ischemic post-conditioning,IPC）对大鼠脊髓缺血再灌注损伤（Spinal cord ischemia reperfusion injury,SCIRI）的保护作用并检测其对钙敏感受体（Calcium-sensing receptor,CaSR）及内质网应激相关标志物Caspase-12表达的影响。方法:五十只SD大鼠被完全随机化等分为5个组（为充分避免因不同动物个体之间的差异而产生随机误差）:假手术组（Sham组）,缺血再灌注模型组（IR组）,IR模型+缺血后适应组（IPC组）,IPC组+激动剂（IPC-GdCl3组）和IR模型+抑制剂组（NPS2390组）。Sham组在手术中只需显露大鼠腹主动脉的一段而不用动脉夹阻断血流,其余各组阻断腹主动脉25分钟左右后再松开,构建脊髓IR模型;IPC组于恢复血流3-4分钟后给予三个周期的缺血后适应操作;IPC-GdCl3组在连续2天尾静脉注射CaSR激动剂GdCl3后行IPC组操作;对于NPS2390组我们采取的干预方法是提前2天,每天通过尾静脉注射一定量的NPS2390,随后建立IR模型。通过3B评分法对大鼠后肢运动功能进行评价来推测脊髓再灌注损伤的程度区别,我们选用TUNEL法检测脊髓组织中细胞凋亡数目并通过蛋白质免疫印迹技术及免疫组织化学定量检测CaSR及Caspase-12表达后记录数据予以分析。结果:1.除Sham组以外其余4组大鼠3B评分均少于Sham组（P<0.05）,对于IPC组及NPS2390组,分数则分别多于IR组和IPC-GdCl3组（P<0.05）。2.TUNEL法阅片记录显示,假手术组仅能看到零星的阳性反应;IR组和IPC-GdCl3组阳性细胞数目多于IPC组及NPS2390组（P<0.05）。3.蛋白免疫印迹检测结果可见,建模各组CaSR及Caspase-12蛋白印迹表达量显着高于假手术组（P<0.05）;IR组及IPC-GdCl3组的CaSR及Caspase-12表达量分别高于IPC组及NPS2390组（P<0.05）。4.免疫组织化学结果可见,除Sham组以外的其余建模各组CaSR及Caspase-12蛋白表达高于假手术组（P<0.05）;IR组及IPC-GdCl3组的CaSR及Caspase-12表达量分别高于IPC组及NPS2390组（P<0.05）。结论:1.缺血后适应能够对大鼠脊髓缺血再灌注损伤起到一定程度的恢复作用并改善相关功能损害;2.缺血后适应在保护过程中可抑制脊髓组织中CaSR及Caspase-12的表达。
陆秋安[6]（2020）在《脊柱短缩在脊柱畸形PVCR术中保护脊髓机制的研究与临床应用》文中研究表明[目的]1.通过建立猪脊柱畸形模型研究非截骨矫形以进行或不进行适当脊柱短缩对脊柱畸形猪脊髓血流,神经电生理,微循环代谢物的影响。2.研究适当的脊柱短缩是否可以通过避免神经元细胞钙蛋白酶信号通路的激活从而对脊髓功能起到保护作用。3.探究临床中重度脊柱畸形患者采用PVCR技术矫形中适当短缩脊柱对脊髓血流,神经电生理,脊髓功能的影响。[方法]1.脊柱畸形模型建立:选取18只2月龄实验猪采用栓系法建立脊柱畸形模型,造模手术后饲养2月行X线检查。2.不同矫形操作下脊柱畸形模型的脊髓血流、神经电生理监测:选取正常实验猪设置Control组,使用Allen法建立脊髓损伤模型设置为SCI组。选取造模成功的脊柱畸形猪随机分为非截骨矫形组,2/4组,0/4组。其中,非截骨矫形组实验动物采用钉棒系统直接进行矫形。2/4组采用PVCR技术进行矫形,并在椎体切除完成后短缩包含椎体上、下椎间盘的一个椎节截骨间隙的1/2高度再进行矫形。0/4组采用PVCR技术在不进行脊柱短缩下进行矫形。各实验组在手术的各关键阶段使用激光多普勒血流仪对脊髓血流进行监测,并使用术中神经肌电监测仪对神经电生理进行监测。3.手术操作完成后取脊髓标本采用Elisa法行血管内皮素-1及血红素氧合酶-1检测。4.病理学检测:取上述脊髓标本行HE染色光镜下观察。5.取上述标本行神经细胞内钙离子,钙蛋白酶含量（western blot）,caspase-3表达（免疫荧光标记）,钙蛋白酶活性检测。6.临床研究:选取采用PVCR技术进行矫形且椎体切除水平高于L1的严重僵硬性脊柱后凸畸形患者。术前、术后进行神经功能检测。矫形过程中采用激光多普勒血流仪对不同手术阶段的脊髓血流进行监测,采用神经肌电监测仪对术中全程神经电生理进行监测。[结果]1.共18只脊柱畸形猪模型建立成功,冠状位平均Cobb角为57.3±3.9度,矢状面Cobb角为23.9±3.2度。2.脊髓血流:a.脊柱畸形模型（n=18）脊髓血流凹凸侧存在一定的差异,凹侧为305.0±47.0PU,凸侧为312.7±33.8PU,但无统计学差异（p>0.05）。b.SCI组（n=6）脊髓血流在脊髓损伤造模后明显下降,由椎板切除时的317.8±39.4PU下降至130.4±32.5PU,为椎板切除时的41.7%c.非截骨矫形组（n=6）椎板切除时脊髓血流为310.8±37.8PU,矫形后为290.5±33.5PU,矫形30min后为288.7±35.1PU。d.VCR后下降至椎板切除时的的78.5%（n=12）。e.0/4组SCBF椎板切除后为306.1 ±42.01PU,VCR后下降至239.2±37.1PU,两者间存在统计学差异（p<0.05）。矫形后进一步下降低至218.5±36.4PU,矫形完成30min后再次下降,此时脊髓血流为202.8±24.OPU。f.2/4组椎板切除时脊髓血流为310.5±48.7PU,VCR后下降至245.8±43.3PU,两者间存在统计学差异（p<0.05）,短缩后升高至321.1±40.9,矫形后下降为285.9±34.5PU,矫形完成30min后恢复至299.8±44.2PU。3.神经电生理监测结果:除SCI组引起神经电生理监测报警外其余各组均未发生神经电生理监测报警。4.脊髓血红素氧合酶-1（HO-1）含量:Control组为 0.095±0.019U/mg,非截骨矫形组为 0.120±0.027 U/mg,0/4 组为 0.165±0.025U/mg,2/4 组为 0.154±0.016 U/mg,SCI 组为 0.175±0.027U/mg。5.内皮素-1含量:Control组为2.47±0.22ug/g,非截骨矫形组为2.38 ±0.34ug/g,0/4 组为 3.68±0.48ug/g,2/4 组为 2.57±0.47ug/g,SCI 组为 6.03±1.19ug/g。5.病理结果:与Control组相比,非截骨矫形组、2/4组神经元细胞未见明显异常;0/4神经元细胞轻度水肿;SCI存在明显坏死。6.神经细胞内钙离子:与Control组相比,非截骨矫形组、2/4组荧光强度未见明显升高,0/4荧光强度升高,SCI组明显升高。7.钙蛋白酶含量及活性:与Control组相比,非截骨矫形组、2/4组钙蛋白酶表达及活性未见明显升高,0/4钙蛋白酶表达较高,SCI组明显升高。8.caspase-3:与Control组相比,非截骨矫形组、2/4组神经元细胞caspase-3存在少量表达,0/4 caspase-3表达较高,SCI组明显升高。9.临床研究共纳入十二名严重的硬性脊柱后凸畸形患者。椎板切除时脊髓血流为316.4±86.1PU,VCR 后降至 228.2±67.5 PU（p<0.05）。第一次缩短和矫形后,SCBF增加到241±76.8 PU,中间次缩短和矫形后脊髓血流增加到296±99.6PU,与VCR后的脊髓血流相比相比,增加了 121%。最后一次缩短和矫形后脊髓血流降低至258.2±84.7 PU。终末固定后脊髓血流维持在270.9±65.4 PU。所有患者术后神经体均为阴性,术中所有患者的MEP和SSEP均未达到的警戒值。[结论]1.较非截骨矫形相比采用PVCR技术矫形对脊髓血流及微循环代谢影响更大,但适当的脊柱短缩可明显减少这一影响。2.PVCR矫形术中适当短缩脊柱降低脊髓张力可抑制钙蛋白酶信号通路的激活,对神经细胞发挥保护作用,从而增加脊髓对后续脊柱矫形过程的耐受性。3.重度脊柱畸形PVCR矫形术中不同步骤对脊髓血流的影响各具特征;矫形前适当的脊柱缩短可改善脊髓张力,保护脊髓血流灌注,有效防止术中脊髓损伤的发生。
李西锋[7]（2020）在《新西兰兔脊髓血供来源及TSG-6对大鼠蛛网膜下腔出血后氧化应激的调控机制研究》文中指出第一部分 新西兰兔脊髓血供来源的解剖学研究目的:描述新西兰兔脊髓各节段血供的来源和分布特点。方法:采用10只成年新西兰兔,从升主动脉灌注红色硅胶,经10%甲醛溶液固定后,进行解剖学研究。结果:新西兰兔的颈段脊髓血供主要来源于椎动脉和小脑后下动脉;胸段脊髓血供主要来源于肋间最上动脉、肋间动脉和肋下动脉;腰段脊髓血供主要来源于腰动脉、骶正中动脉;骶尾段神经根丝主要由髂内动脉和骶正中动脉供血。供应脊髓的前根髓动脉左、右两侧呈不对称分布,颈、腰段以右侧多见,胸段以左侧多见,且腰根髓大动脉常位于左侧;脊髓后根髓动脉左、右两侧分布对称,且颈、腰段血供较胸段丰富。结论:新西兰兔的脊髓血供与人类脊髓血供存在差异,因此在选用新西兰兔制作脊髓血管畸形造成蛛网膜下腔出血或脊髓缺血再灌注损伤模型时,应考虑到上述解剖变异因素对该模型的影响。第二部分 TSG-6对大鼠蛛网膜下腔出血后氧化应激的调控机制研究背景:动脉瘤性蛛网膜下腔出血的患者具有较高的致死、致残率,氧化应激在蛛网膜下腔出血后的早期脑损伤过程中发挥重要作用,以往的研究表明TSG-6具有抑制氧化应激反应的作用,本研究主要探索TSG-6能否调控蛛网膜下腔出血后早期氧化应激反应,从而减轻脑损伤。方法:我们的实验对象是健康成年雄性SD大鼠（280～320g）,选择颈动脉穿刺法制作蛛网膜下腔出血模型,经脑室注射给予TSG-6重组蛋白和TSG-6特异性siRNA。采用改良Garcia行为学评分量表,干湿重法脑水肿检测,TUNEL染色,免疫荧光,Western-blot等方法来评估TSG-6对SAH后脑损伤的保护作用。结果:TSG-6可以减轻蛛网膜下腔出血后的脑水肿、行为学功能缺损、血脑屏障的破坏以及神经元的凋亡;TSG-6可以增加Ho-1和Bcl-2的表达,同时抑制Nox2、Bax和Cleaved caspase-3在脑组织中的含量;脑室内注射TSG-6特异性siRNA可以解除TSG-6对蛛网膜下腔出血后氧化应激反应的抑制作用和脑损伤的保护作用。结论:TSG-6可以通过增高脑组织中Ho-1的表达从而抑制Nox2的活性,抑制蛛网膜下腔出血后早期脑损伤中的氧化应激反应,同时还可以抑制细胞凋亡蛋白Bax和Cleaved caspase-3的表达,减轻细胞凋亡,从而改善蛛网膜下腔出血后的神经功能缺损。
戴晨[8]（2019）在《810nm弱激光对M1型骨髓源性巨噬细胞的调控作用及其机制研究》文中研究指明脊髓损伤（spinal cord injury,SCI）的修复是尚未解决的世界性难题。研究表明,减轻继发性损伤是促进SCI修复和改善患者临床预后的关键环节。巨噬细胞（M?）是参与SCI继发性损伤最重要的炎症细胞。应答于损伤区内环境中不同的细胞因子,巨噬细胞表现出M1和M2两种细胞表型。其中,对SCI修复起负面作用的M1型巨噬细胞不仅数量众多,且分布广泛,在病程中占据主导地位;而起正面作用的M2型巨噬细胞仅一过性增高,且分布相对集中。巨噬细胞这种不平衡的极化特性,是SCI修复不可逆的重要因素之一。调节SCI后M1/M2型巨噬细胞的比例,特别是抑制M1的表达数量,减轻炎症反应可显着促进损伤脊髓的功能恢复。药物干预、细胞移植等现有研究手段,虽能在一定程度调整巨噬细胞极化,但存在药物安全窗窄、免疫排斥反应、临床难以有效实施开展等多种不足,亟需寻找一种更安全、有效、简便可行的治疗方法。弱激光治疗（Low-level LaserTherapy,LLLT）,作为一种经典的物理治疗手段,具有安全、无创、实施简便等优点以及显着的抑炎、促修复作用,目前已广泛应用于皮肤病损、外周神经损伤等临床多个领域。课题组前期研究发现,LLLT可以减轻SCI大鼠损伤部位的炎症反应,抑制胶质瘢痕的形成,促进运动功能的恢复;初步的临床试验结果也证实了LLLT具有促损伤修复的效应。深入研究发现,LLLT可以调节SCI后大鼠损伤区巨噬细胞的极化状态,下调M1的数量,抑制促炎因子TNF-α、IL-13、IL-1β的分泌;上调M2的比例,促进抑炎因子IL-4和神经营养因子BDNF的分泌,增加神经元存活与轴突再生,促进脊髓损伤修复。但是,LLLT是否可以在体外直接作用于M1型骨髓源性巨噬细胞（Bone marrow-derived macrophage,BMDM）,发挥调控M1表型极化和分泌的作用?这种调控作用是以何种途径实现的?在促脊髓损伤修复中的作用是什么?这几点尚不明确。已往研究表明,NF-κB信号通路在调控M1型巨噬细胞极化过程中扮演着重要角色。激活NF-κB可促进巨噬细胞向M1方向极化。那么,NF-κB信号通路是否参与LLLT调控M1表型极化?LLLT条件下NF-κB是如何调控巨噬细胞极化的?带着上述问题,我们开展了以下三方面的研究。实验一:810nm弱激光对M1-BMDM表型极化的影响目的:研究弱激光照射对原代M1型巨噬细胞活性及极化水平的作用方法:Balb/c小鼠骨髓中分离培养原代巨噬细胞,LPS+IFN-γ刺激诱导巨噬细胞M1表型极化,采用流式细胞术检测培养和极化情况。将成熟的M1型巨噬细胞随机分为弱激光照射组与对照组。照射组采用输出功率2mW/cm2、光斑面积4.5cm2,通过照射时长44s、440s、1111s,分别获得0.4J、4J和10J能量参数照射组;对照组置于暗箱,不给于照射。照射后2和24小时,使用CCK-8法对各组细胞进行活性检测,RT-qPCR检测各组细胞iNOS的mRNA表达水平。照射后24小时,Western-blot检测各组细胞iNOS蛋白的表达水平,免疫荧光染色检测各组细胞iNOS蛋白的表达及定位。结果:各能量参数弱激光照射后2小时,对应各组细胞的活性均未发生明显改变;4J组弱激光照射后24小时,细胞活性显着提高。各量参数弱激光照射后2小时,对应各组细胞iNOS的mRNA水平均未发生明显改变;照射后24小时,对应各组细胞iNOS的mRNA水平较对照组均显着下调,以4J组下调效果最为明显。照射后24小时,较对照组,0.4J和4J组显着下调iNOS蛋白水平,4J组效果较0.4J组更为明显。iNOS+细胞比例在0.4J和4J组也显着降低,4J组较0.4J组下降趋势更为显着。结论:810nm弱激光抑制M1-BMDM表型极化的作用在剂量和反应时长上具有一定的依赖性,且所选参数是安全可靠的。实验二:810nm弱激光调控M1-BMDM分泌对神经元轴突的影响目的:研究弱激光影响M1-BMDM分泌对被根神经节细胞轴突的作用方法:弱激光照射条件和细胞分组同实验一。各组弱激光照射后24小时,RT-qPCR检测M1-BMDM促炎因子TNF-α、IL-1β及IL-6的mRNA水平,ELISA法检测M1-BMDM上清液中TNF-α、IL-1β、IL-6、BDNF及NGF的浓度,免疫荧光染色法检测经弱激光照射后M1-BMDM上清过继培养背根神经节细胞24小时后,其轴突生长长度,Western-blot检测转录因子NF-κBp65及其磷酸化蛋白表达水平。照射后2小时和24小时,探针检测M1-BMDM中ROS的含量。结果:照射后24小时,较对照组,各照射组TNF-α和IL-1β的m-RNA表达显着下调,IL-1β的分泌也被显着抑制;4J和10J照射组TNF-α的分泌水平及典极化转录因子NF-κB p65及其磷酸化蛋白表达显着下调;4J照射组IL-6的m-RNA表达和分泌被显着抑制,神经营养因子BDNF和NGF分泌水平显着上调。照射后2小时,较对照组,10J组M1-BMDM中ROS含量显着上升,24小时后,较对照组,4J组ROS含量显着降低。上清移液培养背根神经节细胞24小时后,较对照组,4J及10J组的上清液显着促进背根神经节细胞轴突的生长。结论:弱激光照射可以显着抑制M1-BMDM分泌促炎因子,减弱氧化应激水平,且这种作用可能是通过抑制NF-κB p65及其磷酸化蛋白表达的途径实现的,此外,弱激光具有促进M1-BMDM神经营养因子分泌帮助神经元轴突生长的作用。实验三:810nm弱激光通过Nrf2/NF-κB信号通路调控M1-BMDM表型极化目的:研究弱激光调控M1-BMDM表型极化的机制方法:将细胞分为对照组、M1组、M1+LLLT组、M1+LLLT+Nrf2-si-RNA组,选4J能量参数810nm弱激光对M1+LLLT组和M1+LLLT+Nrf2-si-RNA组进行照射,其余两组置于暗箱,不给于照射。照射后24小时,运用Western-blot检测各组细胞iNOS、Nrf2、NF-κbp65、p-NF-κbp65、p-Ikk-β、IκB-α及p-IκB-α的蛋白表达水平。运用RT-qPCR检测各组细胞中iNOS、Nrf2、NF-κbp65、TNF-α、IL-1β及IL-6的m-RNA表达水平。运用ELISA检测各组细胞TNF-α、IL-1β及IL-6的分泌水平。运用免疫荧光染色和Western-blot检测Nrf2和NF-κbp65的入核水平。结果:我们建立了一个体外M1型骨髓源性巨噬细胞（M1-BMDMs）弱激光疗法模型,结果表明,弱激光照射可以激活M1型骨髓源性巨噬细胞的抗氧化应激经典转录因子Nrf2,同时抑制经典IKK-β/IκBα/NF-κB p65信号通路。通过RNA干扰技术使Nrf2沉默,我们构建了M1-BMDM弱激光疗法的体外模型,进一步研究弱激光调节NF-κB p65的特异性机制。研究结果显示通过沉默Nrf2,可以逆转弱激光疗法对IKK-β/IκB-α/NF-κB p65信号通路的调节作用,而且M1-BMDM分泌的促炎因子也表现出了一致的变化。结论:弱激光调控Nrf2/ikk-β/ikb-α/NF-κBp65信号通路抑制M1型巨噬细胞的表型极化和促炎因子分泌。
赵林林[9]（2019）在《过表达miR-25的骨髓间充质干细胞外泌体对脊髓短暂缺血的保护作用》文中研究表明目的:脊髓缺血再灌注损伤是心脏大血管外科手术术后严重并发症,其发生率可高达到3-8%,严重者可以引起截瘫甚至死亡,极大程度的威胁了患者的健康与生活。随着基因工程技术的不断发展,干细胞移植治疗脊髓缺血再灌注损伤引起了广泛的关注。外泌体作为细胞间相互交流的重要媒介,可通过膜受体等途径与靶细胞结合,参与生物信息的调控。已有研究表明移植骨髓间充质干细胞分泌的外泌体在神经系统损伤的修复中发挥重要的作用。本研究体外培养大鼠骨髓间充质干细胞（bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs）,利用基因转染技术获得稳定转染miR-25的骨髓间充质干细胞,并提取其外泌体,鞘内注射至大鼠脊髓缺血再灌注损伤模型,观察过表达miR-25的骨髓间充质干细胞外泌体对脊髓短暂缺血的保护作用,从而为神经系统损伤的外泌体生物治疗方式提供实验思路和治疗依据。研究方法:1.复苏大鼠骨髓间充质干细胞并进行传代培养,光学显微镜下观察细胞形态。贴壁法培养扩增所需的骨髓间充质干细胞,通过慢病毒载体感染的方式构建过表达miR-25骨髓间充质干细胞,通过荧光显微镜观察感染情况,RT-PCR法测定细胞中miR-25的表达情况。2.以去外泌体血清大量培养骨髓间充质干细胞、过表达miR-25骨髓间充质干细胞及对照病毒感染的骨髓间充质干细胞并收集细胞上清,通过差速离心法提取3种细胞来源的外泌体,利用透射电子显微镜观察外泌体形态、大小,wsstern-blot法测定外泌体典型标志蛋白的表达,RT-PCR法测定三种细胞外泌体中miR-25的表达。3.利用开胸阻断锁骨下动脉远端降主动脉15分钟建立大鼠脊髓缺血再灌注损伤模型。雄性SD大鼠随机分为5组。除假手术动物外,所有大鼠均行脊髓缺血15分钟。（1）假手术组（sham组）（n=11）:大鼠仅行无脊髓缺血的手术。（2）对照组（n=11）:脊髓缺血前1天,每只大鼠鞘内注射PBS（10uL）。（3）Exo组（n=12）:脊髓缺血前1d,每只大鼠鞘内注射骨髓间充质干细胞外泌体（10uL,2mg/mL）。（4）vector-Exo组（n=10）:脊髓缺血1d前,每只大鼠鞘内注射对照载体感染骨髓间充质干细胞外泌体（10μL,2mg/mL）。（5）miR-25-Exo组（n=11）:脊髓缺血1d前,每只大鼠鞘内注射pre-miR-25病毒感染骨髓间充质干细胞外泌体（10μL,2mg/mL）。取5组动物进行平行实验,采用Motor Deficit Index（MDI）运动功能评分法,于再灌注后24h、48h和7d对8组动物进行后肢运动功能评分;行为学后处死动物取腰4-6节段脊髓组织,进行Nissl染色计数健存神经元;ELISA法检测脊髓组织中白细胞介素（IL）-1β、肿瘤坏死因子（TNF）-α含量;试剂盒检测丙二醛（MDA）含量以及超氧化物歧化酶（SOD）活性;western blot法检测NOX 2和NOX 4的蛋白表达;qRT-PCR检测miR-25的表达。结果:1.经过复苏、培养、传代扩增大鼠骨髓间充质干细胞形态呈多角形或长梭形,第3代可以作为转染的靶细胞。转染Pre-miR-25慢病毒的骨髓间充质干细胞经嘌呤霉素筛选后,骨髓间充质干细胞miRNA-25水平可显着提高（P<0.01）,而转染空载体的骨髓间充质干细胞未见明显的阳性表达。2.透视电子显微镜下观察到外泌体呈椭圆形或圆形膜性囊泡,囊泡内含有大量内容物,且直径在50-100nm之间,符合外泌体的结构特征和大小,提取的三组细胞中均表达外泌体标志蛋白CD9、CD63和CD81。通过转染Pre-miRNA-25慢病毒可显着提高间充质干细胞外泌体中miR-25水平（P<0.01）。3.1)5组大鼠体重、直肠温度无明显差异（P>0.05）;与Sham组相比,其余组阻断前近段平均动脉压与远端平均动脉压明显降低（P<0.05）;2)大鼠后肢运动功能评分:与对照组相比,Exo组、vector-Exo组和miR-25-Exo组三个观察点的MDI评分均显着降低,在灌注后48小时和7天这两个观察点,miR-25-Exo组的MDI评分较Exo组和vector-Exo组显着降低（P=0.003,P=0.004）;3)脊髓组织学检查:Nissl染色显示,与对照组相比,Exo组、vector-Exo组和miR-25-Exo组脊髓组织病理改变明显得到改善,miR-25-Exo组改善程度最好;虽然Exo组、vector-Exo组脊髓灰质内健存神经元数目较对照组显着增多（P<0.001）,但仍然是miR-25-exo组存活的神经元最多（P=0.002）。4)脊髓组织中IL-1β和TNF-α含量:与sham组相比,IL-1β和TNF-α在对照组、Exo组、vector-Exo组和miR-25-Exo组再灌注后均显着升高（P<0.001）,而4组之间无显着差异（P>0.05）;5)脊髓组织中MDA含量:与sham组相比,MDA在对照组、Exo组、vector-Exo组和miR-25-Exo组再灌注后均显着升高（P<0.001,P<0.001,P<0.001,and P=0.010）,Exo组和vector-Exo组较对照组MDA含量升高,但无统计学差异（P=0.233和P=0.324）,miR-25-Exo组与对照组、Exo组相比MDA含量显着降低（P<.001 and P=0.022）;6)脊髓组织中SOD活性:与sham组相比,其余4组SOD活性显着下降（P<0.01）,只有miR-25-Exo组与对照组相比SOD活性显着升高（P=0.03）;7)脊髓组织中miR-25的表达:对照组与sham组相比较,脊髓组织中miR-25的表达水平轻度升高,但无显着性差异（P>0.05）,而miR-25-Exo组和对照组、Exo组及vector-Exo组相比,脊髓组织中miR-25的表达水平均显着升高（P<0.01）;8)脊髓组织中NOX2表达:与sham组相比,NOX2在对照组、Exo组、载体-Exo组和miR-25-Exo组再灌注后均显着升高（P=0.021,P=0.016,P=0.007,and P=0.002）,但4组之间脊髓缺血组织NOX2的表达无显着性差异（P>0.05）;9)脊髓组织中NOX4表达:与sham组相比,NOX4在对照组、Exo组、vector-Exo组再灌注后均显着升高（P=0.001,P=0.003,P=0.007）,而miR-25-Exo组与对照组、Exo组相比,脊髓组织中NOX4表达显着降低（P<0.002和P=0.012）。结论:通过慢病毒载体感染的方式成功构建过表达miR-25的骨髓间充质干细胞,通过差速离心法可以成功提取细胞外泌体,并且通过慢病毒载体感染的方式可以显着提高骨髓间充质干细胞外泌体中miR-25的表达。骨髓间充质干细胞外泌体对缺血脊髓具有神经保护作用,过表达miR-25的骨髓间充质干细胞外泌体对缺血脊髓的保护作用更强。这些证据为进一步研究miR-25转染骨髓间充质干细胞的体外增殖并稳定表达和治疗一些相关疾病的实验奠定了基础。
路坦[10]（2018）在《脂氧素A4对大鼠脊髓缺血再灌注损伤的保护作用及机制研究》文中提出脊髓缺血再灌注损伤（Spinal cord ischemia/reperfusion injury,SCII）指的是在脊髓损伤因素解除后,血液再通出现的神经损伤症状,如皮肤麻木、肢体无力、瘫痪等。SCII具有不可预知性、难治性等特点,因此成为脊髓损伤中较为严重的一种类型。SCII不仅导致了个人生活质量的下降,也给家庭和社会带来了巨大的负担。如何治疗SCII也是目前医务人员的难点和重点。脂氧素A4（Lipoxin A4,LXA4）是脂氧素家族的成员,主要由哺乳动物细胞合成,具有强有力的抗炎作用。目前已经观察到LXA4可以通过炎症反应参与到呼吸道感染、胃肠道炎症的治疗中,在中枢神经系统损伤模型中观察到LXA4的神经保护作用。因此在本课题中将LXA4应用于大鼠SCII动物模型中,观察LXA4对SCII是否存在保护作用。目的在本研究中成功构建了SCII大鼠动物模型,并观察LXA4对该动物模型的保护作用。首先探讨在大鼠SCII模型中,LXA4是否是通过抑制炎症反应和细胞凋亡,从而起到保护作用;其次研究LXA4对SCII保护作用的分子机制;最后讨论细胞自噬在SCII的作用和LXA4对细胞自噬的影响。方法1.LXA4通过抑制炎症反应减轻大鼠SCII损伤的实验研究通过双夹闭腹主动脉法建立大鼠SCII模型并随机分为空白组（Sham组）、实验组（LXA4组）及缺血再灌注组（SCII组）、三组,其中LXA4组的大鼠在关腹后30min脊髓鞘内注射10μl LXA4（300 pmol）,SCII组则注射生理盐水。再灌注6h、12h、24h、48h时对三组大鼠行Basso-Beattie-Bresnahan（BBB）评分及检测腰段脊髓组织髓过氧化物酶（MPO）活性和炎性因子肿瘤坏死因子-α（Tumor necrosis factor-α,TNF-α）和白介素-1β（Interleukin-1β,IL-1β）的水平,并在再灌注24h时通过HE染色观察脊髓组织的形态学改变。2.LXA4通过抑制细胞凋亡缓解大鼠SCII损伤的实验研究构建大鼠SCII模型及分组同第一部分。三组大鼠于再灌注24h后取出腰段脊髓应用Tunel法检测脊髓组织中细胞凋亡情况,使用Elisa法检测B淋巴细胞-2（B-cell lymphoma-2,Bcl-2）和Bcl-2相关X蛋白（Bcl-2 associated X protein,Bax）,并通过Western blot检测脊髓组织的Cleaved-Caspase-3含量。3.LXA4对大鼠SCII保护作用的机制研究构建大鼠SCII模型及分组同第一部分。三组大鼠分别于再灌注24h后颈椎脱臼法处死,处死后取出腰段脊髓应用Western blot对检测组织中（Formyl peptide receptor-2/Lipoxin A4 receptor,FPR2/ALX）、磷酸化NF-κB抑制因子（Phosphorylation of inhibitor of NF-κB kinases,p-IKKβ）和磷酸化核转录因子κB（Phosphorylation of nuclear factor-kappa B,p-NF-κB）的蛋白表达水平。4.细胞自噬在SCII中的作用及LXA4对其影响以同第一部分构建大鼠SCII模型及分组。三组大鼠分别于再灌注24h后颈椎脱臼法处死,处死后取出腰段脊髓。首先使用LC3B荧光染色法对三组大鼠的凋亡细胞进行染色并计数,其次应用Western blot检测微管相关蛋白3（Microtubule-associated protein light chain3,LC3）-Ⅱ/LC3-Ⅰ、γ-氨基丁酸受体A相关蛋白（γ-aminobutyric acid type A receptor associated protein,GABARAP）及哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（Mammalian target of rapamycin,mTOR）的表达。结果1.LXA4通过抑制炎症反应缓解SCII损伤与Sham组相比,LXA4组和SCII组大鼠的BBB评分降低,MPO活性、IL-1β及TNF-α含量均显着升高,差异有显着意义（P<0.05）。LXA4组与SCII组相比:（1）在12h、24h、48h时LXA4组大鼠造模后BBB评分增加（P<0.05）;（2）在各时间点LXA4组大鼠MPO活性明显降低（P<0.05）;（3）在12h和24h时,LXA4组的IL-1β及TNF-α含量较SCII组显着下降（P<0.05）;（4）通过HE染色观察到SCII组脊髓灰质出现大量的变性神经元,炎性细胞浸润,LXA4组脊髓组织细胞核形态基本恢复正常。2.LXA4抑制了SCII引起的细胞凋亡,从而达到神经保护作用（1）Sham组大鼠脊髓组织中凋亡细胞较少,SCII组、LXA4组大鼠脊髓的凋亡细胞明显增多,而LXA4组凋亡细胞数较SCII组明显减少,差异均有统计学意义（P<0.05）;（2）SCII组和LXA4组Bcl-2和Bax的含量均较Sham组明显升高（P<0.05）,与SCII组相比,LXA4组的Bcl-2表达明显增高,Bax表达降低,差异有统计学意义（P<0.05）。（3）SCII组及LXA4组大鼠的Cleaved-Caspase-3蛋白含量较Sham组明显增高（P<0.05）,经过LXA4治疗后,脊髓组织中Cleaved-Caspase-3含量明显下降（P<0.05）。3.LXA4对大鼠SCII保护作用的机制（1）SCII组和LXA4中大鼠脊髓组织中FPR2/ALX蛋白含量较Sham组明显增高（P<0.05）,LXA4组的FPR2/ALX含量明显高于SCII组,差异有统计学意义（P<0.05）;（2）Sham组中p-IKKβ表达较高,SCII组和LXA4组的p-IKKβ蛋白表达明显低于Sham组（P<0.05）,LXA4组的p-IKKβ表达明显高于SCII组（P<0.05）;（3）p-NF-κB在Sham组中表达较高,SCII组和LXA4组的p-NF-κB蛋白表达明显低于Sham组（P<0.05）,LXA4组的p-NF-κB表达明显高于SCII组（P<0.05）。4.细胞自噬参与了LXA4对大鼠SCII的保护作用（1）Sham组LC3B阳性细胞较少,与Sham组相比,SCII组和LXA4组的LC3B阳性细胞数明显升高（P<0.05）,LXA4组与SCII组相比,阳性细胞数明显减少（P<0.05）。（2）SCII组及LXA4组大鼠的LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比例较Sham组明显增高（P<0.05）,经过LXA4治疗后,脊髓组织中LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ的比例明显下降,较SCII组有明显差异（P<0.05）。（3）SCII组及LXA4组大鼠的GABARAP的表达较Sham组明显增高（P<0.05）,经过LXA4治疗后,脊髓组织中GABARAP的表达在数量上有一定的下降,但与SCII组相比,无显着差异（P>0.05）。（4）mTOR在三组中并无明显差异,p-mTOR在三组中有明显差异,与Sham组相比,SCII组的p-mTOR蛋白表达明显降低（P<0.05）,当给与LXA4后,p-mTOR较Sham组和SCII组均明显升高（P<0.05）。结论1.LXA4可以对大鼠SCII起到保护作用,其保护作用是通过抑制SCII后的炎症反应和细胞凋亡进行的;2.LXA4抑制炎症反应和细胞凋亡的机制是:LXA4与脊髓组织中的FPR2/ALX受体相结合,激活细胞质中的IKKβ,使IKKβ的磷酸化表达明显增加,降低了细胞质中NF-κB的活化,抑制了炎症反应和细胞凋亡,从而起到治疗SCII的作用;3.当SCII发生后,激活了细胞自噬,说明细胞自噬参与了SCII发生的过程,给与LXA4后,细胞自噬被抑制,SCII缓解,在这一过程中,mTOR蛋白的激活参与了LXA4的保护作用。
二、血红素氧化酶-1在脊髓缺血再灌注脊髓损伤后的表达（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、血红素氧化酶-1在脊髓缺血再灌注脊髓损伤后的表达（论文提纲范文）
（1）Nrf2-ARE调控神经-血管交互作用参与脊髓损伤后的神经修复（论文提纲范文）
| 0引言Introduction |
| 1 资料和方法Data and methods |
| 1.1 资料来源 |
| 1.2 文献的筛选标准 |
| 1.3 资料提取与文献质量评价 |
| 2 结果Results |
| 2.1 Nrf2-ARE的分子基础及调控机制 |
| 2.1.1 Nrf2-ARE的分子基础 |
| 2.1.2 Nrf2-ARE的调控机制 |
| 2.2 神经-血管的交互作用 |
| 2.2.1 神经元-星形胶质细胞 |
| 2.2.2 内皮细胞-神经元 |
| 2.2.3 星形胶质细胞-内皮细胞 |
| 2.3 Nrf2-ARE对神经血管的作用 |
| 2.3.1 Nrf2-神经元 |
| 2.3.2 Nrf2-星形胶质细胞 |
| 2.3.3 Nrf2-内皮细胞 |
| 2.4 Nrf2-ARE的神经血管保护机制 |
| 3 结语与展望Conclusions and prospects |
（2）血红素加氧酶-1激活AMPK信号通路调节脊髓损伤后小胶质细胞介导的神经炎症（论文提纲范文）
| 英文缩略词表 |
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 第一部分 SCI后炎症细胞的变化动态 |
| 一、材料与方法 |
| 二、结果 |
| 三、讨论 |
| 四、小结 |
| 第二部分 构建HO-1 过表达慢病毒及感染小胶质细胞 |
| 一、材料与方法 |
| 二、结果 |
| 三、讨论 |
| 四、小结 |
| 第三部分 HO-1 过表达对SCI后小胶质细胞介导的神经炎症的作用 |
| 一、材料与方法 |
| 二、结果 |
| 三、讨论 |
| 四、小结 |
| 第四部分 HO-1 过表达对SCI后小胶质细胞介导的抗神经炎症的分子机制 |
| 一、材料与方法 |
| 二、结果 |
| 三、讨论 |
| 四、小结 |
| 全文总结 |
| 参考文献 |
| 文献综述 脊髓损伤治疗的研究进展 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
（3）鼠尾草酸抑制铁死亡减轻脊髓损伤的实验研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 前言 |
| 第一部分 大鼠脊髓损伤模型中铁死亡表现的实验研究 |
| 1 研究内容与方法 |
| 1.1 研究对象 |
| 1.2 内容与方法 |
| 1.3 统计分析 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 第二部分 鼠尾草酸抑制铁死亡减轻PC12 细胞损伤的实验研究 |
| 1 研究内容与方法 |
| 1.1 研究对象 |
| 1.2 内容与方法 |
| 1.3 统计分析 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 第三部分 鼠尾草酸抑制铁死亡的分子机制研究 |
| 1 研究内容与方法 |
| 1.1 研究对象 |
| 1.2 内容与方法 |
| 1.3 统计方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 第四部分 鼠尾草酸改善大鼠脊髓损伤的实验研究 |
| 1 研究内容与方法 |
| 1.1 研究对象 |
| 1.2 内容与方法 |
| 1.3 统计方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 结论 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 综述 铁死亡在创伤性脑和脊髓损伤中的研究进展 |
| 参考文献 |
| 攻读博士学位期间获得的学术成果 |
| 个人简介 |
| 导师评阅表 |
（4）2-（2-苯并呋喃基）-2-咪唑啉在急性脊髓损伤大鼠模型中的神经保护作用及其机制研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 第一章 绪论 |
| 1.1 引言 |
| 1.2 咪唑啉受体(IR)的研究进展 |
| 1.2.1 咪唑啉受体(IR)的简介 |
| 1.2.2 咪唑啉受体(I_2R)的简介 |
| 1.2.3 咪唑啉I_2受体与神经保护功能的关系 |
| 1.3 Nrf2参与中枢神经系统保护作用 |
| 1.4 总结与展望 |
| 参考文献 |
| 第二章 2-(2-苯并呋喃基)-2-咪唑啉在脊髓损伤大鼠模型中的作用 |
| 2.1 前言 |
| 2.2 实验部分 |
| 2.2.1 实验动物 |
| 2.2.2 实验仪器 |
| 2.2.3 实验方法 |
| 2.3 结果 |
| 2.3.1 钳夹法脊髓损伤大鼠模型成功建立 |
| 2.3.2 2-BFI的应用有助于脊髓损伤大鼠神经功能恢复 |
| 2.4 讨论 |
| 2.5 小结 |
| 参考文献 |
| 第三章 2-(2-苯并呋喃基)-2-咪唑啉在脊髓损伤大鼠模型中的作用机制 |
| 3.1 前言 |
| 3.2 实验部分 |
| 3.2.1 实验动物 |
| 3.2.2 实验所使用的试剂及生产厂家 |
| 3.2.3 实验所使用的主要仪器和生产厂家 |
| 3.2.4 实验方法 |
| 3.3 实验结果 |
| 3.3.1 2-BFI增加脊髓损伤局部组织抗氧化酶活性 |
| 3.3.2 2-BFI增加脊髓损伤组织抗凋亡水平,抑制细胞坏死 |
| 3.4 讨论 |
| 3.5 小结 |
| 参考文献 |
| 第四章 2-(2-苯并呋喃基)-2-咪唑啉在脊髓损伤大鼠模型中神经保护作用的调节机制 |
| 4.1 前言 |
| 4.2 实验部分 |
| 4.2.1 实验动物 |
| 4.2.2 实验所使用的试剂及生产厂家 |
| 4.2.3 实验所使用的主要仪器和生产厂家 |
| 4.2.4 实验方法 |
| 4.3 实验结果 |
| 4.3.1 2-BFI通过激活核转录因子-E2相关因子/血红素加氧酶(Nr2/HO-1)信号通路保护神经 |
| 4.3.2 2-BFI在神经元细胞及星形胶质细胞内激活核转录因子-E2相关因子/血红素加氧酶(Nrf2/HO-1)信号通路保护神经 |
| 4.4 讨论 |
| 4.5 小结 |
| 参考文献 |
| 第五章 总结与展望 |
| 5.1 总结 |
| 5.2 研究的不足之处 |
| 5.3 展望 |
| 综述（一） 脊髄损伤动物模型 |
| 参考文献 |
| 综述（二） 咪唑啉受体（IR）的研究进展 |
| 参考文献 |
| 综述（三） Nrf2通路研究概况 |
| 参考文献 |
| 英汉主要缩略词表 |
| 在读期间撰写论文及科研情况 |
| 致谢 |
（5）缺血后适应干预大鼠脊髓再灌注损伤时对CaSR和Caspase-12的影响（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 缩写词表 |
| 第一章 绪论 |
| 1.1 前言 |
| 1.2 实验目的 |
| 1.3 实验方法 |
| 1.4 实验内容 |
| 1.5 实验流程图 |
| 第二章 大鼠术后的行为学变化 |
| 2.1 前言 |
| 2.2 实验前准备 |
| 2.2.1 实验动物 |
| 2.2.2 主要试剂及手术器材 |
| 2.3 建模方法 |
| 2.4 行为学评分(Basso-Beattie-Bresnahan,BBB) |
| 2.5 统计学分析 |
| 2.6 实验结果 |
| 2.7 讨论 |
| 第三章 缺血后适应对CaSR及 Caspase-12 表达的影响 |
| 3.1 前言 |
| 3.2 实验材料 |
| 3.3 试剂配制 |
| 3.4 实验方法 |
| 3.4.1 蛋白质免疫印迹试验 |
| 3.4.2 免疫组织化学 |
| 3.5 实验结果 |
| 3.5.1 蛋白质免疫印迹试验 |
| 3.5.2 免疫组织化学 |
| 3.6 讨论 |
| 第四章 大鼠脊髓组织中细胞凋亡的表达 |
| 4.1 前言 |
| 4.2 实验材料及方法 |
| 4.2.1 石蜡切片预处理 |
| 4.2.2 标记和显色反应 |
| 4.3 实验结果 |
| 4.4 讨论 |
| 第五章 结论与展望 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 攻读硕士学位期间发表的文章 |
（6）脊柱短缩在脊柱畸形PVCR术中保护脊髓机制的研究与临床应用（论文提纲范文）
| 缩略词表 |
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 前言 |
| 第一部分: PVCR术矫形中适当脊柱短缩对脊柱畸形猪脊髓血流、微循环代谢物影响的研究 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 第二部分: 适当的脊柱短缩保护脊髓的机制研究 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 第三部分: 重度脊柱畸形患者行脊柱短缩下PVCR矫形血流变化特点的临床研究 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 全文总结 |
| 附录 |
| 综述 脊柱矫形术中脊髄功能变化研究现况 |
| 参考文献 |
| 攻读博士学位期间的学术成果 |
| 致谢 |
（7）新西兰兔脊髓血供来源及TSG-6对大鼠蛛网膜下腔出血后氧化应激的调控机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一部分 新西兰兔脊髓血供来源的解剖学研究 |
| 前言 |
| 一、材料与方法 |
| 二、结果 |
| 三、讨论 |
| 参考文献 |
| 第二部分 TSG-6对大鼠蛛网膜下腔出血后氧化应激的调控机制研究 |
| 前言 |
| 参考文献 |
| 第一章 TSG-6对SAH后EBI的保护作用 |
| 一、引言 |
| 二、材料与方法 |
| 三、结果 |
| 四、讨论 |
| 参考文献 |
| 第二章 TSG-6对SAH后EBI中的氧化应激反应的影响 |
| 一、前言 |
| 二、材料与方法 |
| 三、结果 |
| 四、讨论 |
| 参考文献 |
| 第三章 敲低TSG-6对SAH后EBI中氧化应激反应的影响 |
| 一、前言 |
| 二、材料和方法 |
| 三、结果 |
| 四、讨论 |
| 参考文献 |
| 全文小结 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 英文缩略词对照表 |
| 学习期间发表论文 |
| 在读期间参与导师课题 |
| 致谢 |
（8）810nm弱激光对M1型骨髓源性巨噬细胞的调控作用及其机制研究（论文提纲范文）
| 缩略语表 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 前言 |
| 文献回顾 |
| 实验一 810nm弱激光对M1-BMDM表型极化的影响 |
| 1 材料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 实验二 810nm弱激光调控M1-BMDM分泌对神经元轴突的影响 |
| 1 材料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 实验三 810nm弱激光通过Nrf2/NF-κB信号通路调控M1-BMDM表型极化 |
| 1 材料 |
| 2 方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 个人简历和研究成果 |
| 致谢 |
（9）过表达miR-25的骨髓间充质干细胞外泌体对脊髓短暂缺血的保护作用（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 英文缩略语 |
| 第一部分 :过表达MIR-25骨髓间充质干细胞的制备 |
| 1 前言 |
| 2 材料和方法 |
| 2.1 主要仪器和试剂 |
| 2.1.1 主要实验仪器 |
| 2.1.2 主要试剂 |
| 2.2 实验方法 |
| 2.2.1 SD大鼠骨髓间充质干细胞的复苏和培养 |
| 2.2.2 SD大鼠骨髓间充质干细胞的传代 |
| 2.2.3 BMSCs的形态学检查 |
| 2.2.4 构建过表达mi R-25的BMSCs及其空白对照组vector-MSCs |
| 2.2.5 RT-PCR法检测MSCs、空白载体组MSCs(vector-MSCs)、miR-25MSCs三组细胞中mi R-25 表达情况 |
| 2.2.6 统计学分析 |
| 3 结果 |
| 3.1 BMSCS形态学观察 |
| 3.2 BMSCS生长曲线 |
| 3.3 病毒感染预实验结果 |
| 3.4 构建过表达MIR-25BMSCS及对照载体VECTOR-BMSCS |
| 3.5 MIR-25BMSCS、VECTOR-BMSCS及 BMSCS三组细胞中MIRNA-25 表达情况 |
| 4 讨论 |
| 5 结论 |
| 第二部分 :过表达MIR-25 BMSCS外泌体的提取及鉴定 |
| 1 前言 |
| 2 材料和方法 |
| 2.1 主要仪器和试剂 |
| 2.1.1 主要实验仪器 |
| 2.1.2 主要试剂 |
| 2.2 实验方法 |
| 2.2.1 外泌体的制备和分离纯化 |
| 2.2.2 BCA法测定外泌体蛋白浓度 |
| 2.2.3 纳米颗粒跟踪分析(Nanosight)检测外泌体粒径及外泌体浓度 |
| 2.2.4 外泌体电镜观察 |
| 2.2.5 Western blot检测外泌体CD9、CD63和CD81 的表达 |
| 2.2.6 qRT-PCR检测MSCs、阴性对照vector+MSCs和 mi RNA-25MSCs三种细胞外泌体中mi RNA-25 的表达 |
| 2.2.7 统计学分析 |
| 3 结果 |
| 3.1 无外泌体血清 |
| 3.2 外泌体鉴定 |
| 3.3 外泌体中MIR-25 的表达 |
| 4 讨论 |
| 5 结论 |
| 第三部分 :过表达MIR-25的BMSCS外泌体对缺血再灌注脊髓损伤的神经保护作用 |
| 1 前言 |
| 2 材料和方法 |
| 2.1 主要仪器和试剂 |
| 2.1.1 主要实验仪器 |
| 2.1.2 主要试剂 |
| 2.2 实验对象 |
| 2.3 实验分组 |
| 2.4 试验方法 |
| 2.4.1 建立大鼠蛛网膜下腔注射模型 |
| 2.4.2 建立大鼠脊髓缺血再灌注损伤模型 |
| 2.4.3 运动功能评分 |
| 2.4.4 Nissl染色 |
| 2.4.5 ELISA法测脊髓组织中IL-1β、TNF-α的含量 |
| 2.4.6 脊髓组织MDA含量测定 |
| 2.4.7 脊髓组织SOD活性测定 |
| 2.4.8 Western blot测脊髓组织NOX2和NOX4 的含量 |
| 2.4.9 RT-PCR测脊髓组织中miR-25 表达 |
| 2.4.10 统计分析 |
| 3 结果 |
| 3.1 各组大鼠基本资料及血流动力学参数 |
| 3.2 运动功能评价 |
| 3.3 脊髓组织超微结构及组织病理学检查 |
| 3.4 各组脊髓组织中 IL-1β、TNF-α 水平 |
| 3.5 各组脊髓组织中MDA含量及SOD活性 |
| 3.6 脊髓组织中MIR-25、NOX2及NOX4 的表达 |
| 4 讨论 |
| 5 结论 |
| 本研究创新性的自我评价 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间取得的研究成果 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（10）脂氧素A4对大鼠脊髓缺血再灌注损伤的保护作用及机制研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| abstract |
| 中英文缩略词表 |
| 第一部分 脂氧素A4通过抑制炎症反应保护大鼠脊髓缺血再灌注损伤的实验研究 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 第二部分 脂氧素A4通过抑制细胞凋亡治疗大鼠脊髓缺血再灌注损伤的实验研究 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 第三部分 脂氧素A4对大鼠脊髓缺血再灌注损伤保护作用的机制研究 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 第四部分 细胞自噬在脂氧素A4治疗大鼠脊髓缺血再灌注损伤的作用 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 脊髓缺血再灌注损伤的防治进展 |
| 参考文献 |
| 个人简历及在学期间发表的学术论文 |
| 致谢 |
四、血红素氧化酶-1在脊髓缺血再灌注脊髓损伤后的表达（论文参考文献）
- [1]Nrf2-ARE调控神经-血管交互作用参与脊髓损伤后的神经修复[J]. 谭荣镑,魏波,李广盛. 中国组织工程研究, 2021(35)
- [2]血红素加氧酶-1激活AMPK信号通路调节脊髓损伤后小胶质细胞介导的神经炎症[D]. 陈文凯. 福建医科大学, 2021(02)
- [3]鼠尾草酸抑制铁死亡减轻脊髓损伤的实验研究[D]. 程杰. 新疆医科大学, 2021(08)
- [4]2-（2-苯并呋喃基）-2-咪唑啉在急性脊髓损伤大鼠模型中的神经保护作用及其机制研究[D]. 林小龙. 苏州大学, 2020(06)
- [5]缺血后适应干预大鼠脊髓再灌注损伤时对CaSR和Caspase-12的影响[D]. 张睿. 江苏大学, 2020(02)
- [6]脊柱短缩在脊柱畸形PVCR术中保护脊髓机制的研究与临床应用[D]. 陆秋安. 昆明医科大学, 2020(02)
- [7]新西兰兔脊髓血供来源及TSG-6对大鼠蛛网膜下腔出血后氧化应激的调控机制研究[D]. 李西锋. 南方医科大学, 2020
- [8]810nm弱激光对M1型骨髓源性巨噬细胞的调控作用及其机制研究[D]. 戴晨. 中国人民解放军空军军医大学, 2019(06)
- [9]过表达miR-25的骨髓间充质干细胞外泌体对脊髓短暂缺血的保护作用[D]. 赵林林. 中国医科大学, 2019(01)
- [10]脂氧素A4对大鼠脊髓缺血再灌注损伤的保护作用及机制研究[D]. 路坦. 郑州大学, 2018(03)